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1、不同治则中药复方对胆汁淤积性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活剂的影响论文.freelula)oncholestasis-inducedliverfibrosisrat’suPA.MethodsBileductligationmethodakethemodelofcholestasis-inducedliverfibrosis.Onelydividedintofivegroup(modelgroup,UDCAgroup,Erzhiedicineinterventiongroupedicinebyintragastr
2、icadministration.Shamandmodelgroupchloridepled.Generalstateofhealth,hepaticfunction(ALT,AST,ALP,TBil)andpathologicalhistologyofhepatictissueeasured.Resultsparedgroup,thelevelofALT,AST,ALP,TBilandthedegreeofliverfibrosisinmodelgroupodelgroup,threeChineseherbal
3、pounddecreasedserumlevelofALP,ALTandAST(P<0.01).ShixiaosanandhefangdecreasedserumlevelofTBil(P<0.01).HefangplerecipeonALPandALT.Threeherbalpoundreleasedliverfibrosistosomeextent(P<0.01),andhefangplerecipe.UDCAdecreasedserumlevelofALTandAST,buthadnoeffectonliv
4、erfibrosis.paredodelgroup,uPAexpressionsignificantlyincreasedinthreeChineseherbalgroups(P<0.01),andhefanggroupiddle,Erzhiotingbloodcirculationandremovingbloodstasiscaninhibitthecholestasis-inducedliverfibrosis.Themechanisma);UV-2102C分光光度计(尤尼克公司);OLYMPUS-ix71显
5、微镜(日本OLYMPUS公司);低温离心机为(eppendorf公司);凝胶成像系统(上海四星生物技术有限公司)。1.3药物二至丸由墨旱莲、女贞子各9g组成;失笑散由五灵脂、蒲黄各6g组成;合方由墨旱莲、女贞子各9g,五灵脂、蒲黄各6g组成。按公式计算给药。大鼠剂量=人剂量×35(人转换因子)/6(大鼠转换因子)计算出人、鼠等效剂量,二至丸为1.75g/(kg·d),失笑散为1.17g/(kg·d),合方为2.92g/(kg·d)。按传统工艺制备成水煎剂,分别减压浓缩至1.75、1.17、2.92g/mL备用。优
6、思弗(熊去氧胆酸,Dr.FalkPahrmaGmbH产品,注册证号:H20050181,购自上海中医药大学龙华医院),同样方法计算出人、鼠等效剂量58.3mg/(kg·d)。所有药物制备、质控由上海中医药大学附属龙华医院制剂中心完成。2实验方法2.1模型制备参照文献1采用胆管结扎复制胆汁淤积性肝纤维化模型。术前禁食不禁水12h,盐酸氯胺酮100mg/kg肌肉注射麻醉,常规腹部皮肤消毒,沿腹正中线切开皮肤,暴露胆总管,于远近端结扎胆总管,中间离断,关腹;假手术组仅开腹暴露并游离胆总管不结扎,关腹。2.2分组及给药S
7、D大鼠70只,假手术组10只,其余60只造模。造模1周后,随机分为模型组(12只),优思弗、二至丸、失笑散及合方组各10只。各治疗组分别给予相应药物灌胃,每日1次,共计3周;假手术组与模型组以同体积生理盐水灌胃。4周末以盐酸氯胺酮腹腔注射麻醉(2mL/kg),腹主动脉采血,处死全部实验动物,分离血清,-80℃保存备用。摘取肝脏称重后,于肝右叶切取1.0cm×1.0cm大小肝组织2块,4%中性甲醛溶液固定。2.3检测指标2.3.1一般情况包括精神状态、活动情况、皮毛光泽度、食量、大小便情况等。2.3.2肝脏形态包括
8、肝脏的重量、外形、色泽、质地。2.3.3生化指标测定谷丙转氨酶(ALT)、谷丙转氨酸(AST)、总胆红素(Tbil)、碱性磷酸酶(ALP)按试剂盒说明书方法测定。2.3.4病理学检测HE染色、胶原纤维染色(Masson)、肝纤维化程度分级标准:汇管区纤维组织无增生为“-”;增生后面积占肝小叶1/3以下为“+”;占肝小叶1/3~2/3为“++”;占肝小叶2/3以上为“+++