尿激酶型纤溶酶原激活物对关节软骨蛋白多糖的影响

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1、第23卷第4期石河子大学学报（自然科学版）Vol.23No.42005年8月JournalofShiheziUniversit（yNaturalScience）Aug.2005文章编号：1007-738（32005）04-0442-04尿激酶型纤溶酶原激活物对关节软骨蛋白多糖的影响何斌，史晨辉，王永明，孙建华，石辉（石河子大学医学院第一附属医院骨一科，新疆石河子832008）摘要：观察尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-typeplasminogenactivator，uPA）对关节软骨基质中蛋白多糖的影响。实验选择健康新西兰大白兔42只并随机分为实验组和对照

2、组，实验组24只，对照组18只；实验组在右膝关节内注射uPA0.4µg/0.2mL，对照组注射等容量的生理盐水，注射后在4周、8周、12周分批处死取兔软骨提取测定葡糖氨基聚糖（glycosaminoglycan，GAG）含量。结果显示，在不同时期，GAG的总含量均减少，这些改变随时间的延长而渐不明显。由此可知，尿激酶型纤溶酶原激活物能降解关节软骨蛋白多糖，进而导致关节软骨的破坏。关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物；关节软骨；蛋白多糖中图分类号：T684.3文献标识码：A骨关节炎（osteoarthritis，OA）是严重危害人类身1.2.2染色体健康的慢性进行性关节疾患，

3、主要病变发生在关取股骨髁部软骨行HE染色、甲苯胺蓝染色、电节软骨。以往人们对软骨细胞和基质胶原成分研究镜观察及GAG测定。较多，而对基质中另一主要成分蛋白多糖（proteogly-1.2.3样品的测定can，PG）与OA之间的关系研究较少。近年来分子用稀碱水解和蛋白酶水解超速离心法提取关节生物学的研究进展表明，PG在细胞间信息传递、维软骨基质中的葡糖氨基聚糖（glycosaminoglycan，［2］持细胞表型、与其他基质间相互作用及保持组织整GAG）：在股骨内髁取新鲜软骨，电子天秤称重；阿［2］体功能方面发挥着极其重要的生物学功能，并认为利新蓝法测样品中的GAG总量

4、：最后的测定量尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-typeplasminogen换算成每毫克软骨湿重所含的样品量，并进行统计［1］activator，uPA）对其有降解作用。本研究运用动物学分析。实验来观察uPA对PG的影响以及其在OA发病过1.2.4光镜观察程中的作用。将标本用10%甲醛固定，系列脱水，脱钙，常规石蜡包埋，切片行HE染色及甲苯胺蓝染色。采用1材料与方法双盲法对各标本进行组织学评分，关节软骨退变采［3］1.1材料用组织-组化评分标准（表1）。选择健康6月龄新西兰大白兔42只，体重2.51.2.5电镜观察～3kg。将动物处死后迅速切取实验侧股骨内

5、髁关节软31.2方法骨修成1mm×1mm×2mm长条，投入4%戊二醛酸1.2.1实验分组溶液中固定24h，用0.1moL/L磷酸缓冲液冲洗3次，大白兔雌雄各半，随机分为实验组和对照组，实再加0.1%锇酸固定90min，去离子水冲洗3次，终验组24只，对照组18只；实验组右膝关节内注射止锇酸反应，不同浓度丙酮逐级脱水，脱钙液脱钙后uPA0.4µg/0.2mL，对照组在右膝关节内注射0.2mL以61G环氧树脂浸透、包埋、硬化后修块半薄切片，生理盐水，分笼饲养，分别于4、8、12周处死动物。定位后超薄切片，厚度0.05mm，经电子染色后电镜收稿日期：2005-03-30作者

6、简介：何斌（1971-），男，主治医师，硕士生，从事关节外科研究。电话：0993-2859427。第4期何斌，等：尿激酶型纤溶酶原激活物对关节软骨蛋白多糖的影响443观察。2结果1.2.6数据处理2.1形态学比较结果统计结果组间采用t检验，组内采用q检验。2.1.1光镜观察结果表1软骨退变组织-组化评分标准正常关节软骨按Beninghoff法分为4层：表层、项目标准I.结构0.正常移形层、辐射层和钙化层。对照4、8、12周组：关节1.表面不规则软骨4层结构清晰可辨，软骨细胞排列整齐，潮线完2.血管翳和表面不规则整。甲苯胺兰染色基质呈紫兰色，染色均匀。3.到过渡带的裂隙

7、实验4周，组关节软骨表面可呈波浪样起伏，欠4.到放射带的裂隙光滑，可见软骨细胞水肿、核固缩、退变、排列紊乱，5.到钙化带的裂隙胶原纤维排列杂乱，潮线尚完整，软骨细胞减少。基6.结构完全破坏II.细胞0.正常质染色不均，异染性轻度减少。1.弥漫性细胞过多实验8周，组关节软骨表层软骨变薄，粗糙、部2.局部细胞过多分区域呈绒毛状，表层可见浅裂隙和纤维化改变，软3.细胞过少骨细胞排列紊乱，可见退变软骨细胞，软骨细胞减III.基质染色（异染性）0.正常少，异染性轻、中度减少。1.轻度减少实验12周组关节软骨表层软骨变薄、粗糙，胶原2.中度减少纤维增生明显，软骨