原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究论文

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1、原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究论文.freelL100g/LTCA；0.5g婴儿配方奶粉A和B分别需5mL10g/L及20g/LTCA；2g酸奶则需3mL20g/LTCA才能将蛋白完全沉淀。为原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品的样品前处理提供了有价值的参考。【关键词】乳制品;婴儿配方奶粉;酸奶;蛋白质;毛细管电泳AbstractOnthebasisofthedevelopmentofaneethodfortheanalysisofα-lactalbumin(α-Lac)，β-lactoglobulinA(β-LgA)a

2、ndβ-lactoglobulinB(β-LgB)，differentconcentrationsofaceticacid(HAc)andtrichloroaceticacid(TCA)fortheremovalofproteinsinrailk，infantformulaAandB，andyogurtinatingofproteinsintheabovefoursamples.Theproteinsin2gofrailkcouldbeeliminatedby3mLof100g/LTCA.0.5gofinfantformulaAand

3、Bneeds5mLof10g/Land20g/LTCAtoremovetheproteins.freelLof20g/LTCAisenough.Thepresentresearchmayprovidevaluableinformationforprotein-containingsample(suchasrailk，infantformulaandyogurt)pretreatment.Keyilk;Infantformula;Yogurt;Protein;Capillaryelectrophoresis1引言色谱法分析原料奶、婴儿配

4、方奶粉及酸奶等乳制品中有益或有害化学成分时，必须除去其中的蛋白以得到准确结果，因为蛋白很容易在色谱柱上产生不可逆吸附，导致柱效下降。牛奶蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白组成，其中酪蛋白约占总蛋白的80%，乳清蛋白约占15%。乳清蛋白是酪蛋白沉淀后上清液中含有的蛋白〖1〗饕瑟联乳白蛋白(α-Lac)、β-乳球蛋白(β-Lg)、免疫球蛋白G(IgG)和牛血清白蛋白(BSA)组成。其中α-Lac约占乳清蛋白的3%，β-Lg约占9%，IgG约占2%，BSA约占1%，其它为非蛋白氮(NPN)〖2〗糜昧磕芊窠鲜种样品中的蛋白去除干净，需分

5、析蛋白沉淀后的样品上清液中是否仍有蛋白残留。因此，有必要建立能够准确测定乳清蛋白中含量较高的α-Lac，β-LgA及β-LgB的方法，以监测去除蛋白前后3种蛋白含量的变化，获知蛋白的去除效果。毛细管电泳（CE）法因其非常适合蛋白分析而成为首选方法。常用的CE法一般利用涂层管或裸管，通过往分离缓冲液中添加高分子聚合物以实现蛋白分离〖5，6〗薅渴荨１狙芯拷⒘薈E同时分离并测定α-Lac，β-LgA及β-LgB的方法，考察了HAc和TCA对原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白的去除效果。２实验部分2.1仪器与试剂BeckmanP/A

6、CE5000型毛细管电泳仪（美国Beckman公司），配备紫外检测器；P/ACE工作站；F-33pH/mV型酸度计（北京屹源电子仪器科技公司）；Universal32型离心机（德国Hettich公司）；MilliporeMilli-Elix/RiOs型超纯水器（美国Millipore公司）；旋涡混合器（法国Gilson公司）。硼酸（优级纯，铁岭地区开源化工厂）；CsOH·H2O（99.5%，北京百灵威化学技术有限公司）；冰乙酸(99%)和NaOH（北京化学试剂公司）；羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD，分子量：1540g/mol)，聚

7、氧化乙烯(PEO，分子量：4000kg/mol)，α-Lac，β-LgA及β-LgB（Sigma-Aldrich公司）。原料奶采自当地奶牛场，婴儿配方奶粉及大果粒酸奶购于当地超市。2g/LPEO储备液：称取0.2gPEO于100mL试剂瓶中，加入100mL水后于50℃水浴中加热直至溶解，摇匀后于室温放置备用。α-Lac，β-LgA及β-LgB储备液：准确称取10mgα-Lac，10mgβ-LgA及10mgβ-ＬgB于1.5mL塑料离心管中，分别加入1mL水溶解，得到质量浓度为10g/L的标准储备液。短期保存可置于4℃冰箱，若长时间保存

8、，则将标准储备液分装后于－20℃冻存。工作液由储备液经0.05mol/LHAc稀释后制得。2.2电泳条件2.2.1测定条件毛细管(50μm×57cm有效长度：50cm，河北永年锐沣色谱配件有限公司）。分离缓冲液：0.5m