原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究

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1、原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究作者：丁晓静杨媛媛李芸赵珊王志【摘要】建立了毛细管电泳法分析α-乳白蛋白、β-乳球蛋白A及β-乳球蛋白B的方法，考察了不同浓度冰乙酸（HAc）及三氯乙酸(TCA)对原料奶、婴儿配方奶粉A和B及酸奶中蛋白的去除效果。结果表明，TCA去除蛋白效果优于HAc，不同样品所需TCA浓度不同：2g原料奶需3mL100g/LTCA；0.5g婴儿配方奶粉A和B分别需5mL10g/L及20g/LTCA；2g酸奶则需3mL20g/LTCA才能将蛋白完全沉淀。为原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品的样品前

2、处理提供了有价值的参考。【关键词】乳制品;婴儿配方奶粉;酸奶;蛋白质;毛细管电泳AbstractOnthebasisofthedevelopmentofanewCEmethodfortheanalysisofα-lactalbumin(α-Lac)，β-lactoglobulinA(β-LgA)andβ-lactoglobulinB(β-LgB)，differentconcentrationsofaceticacid(HAc)andtrichloroaceticacid(TCA)fortheremovalofproteinsi

3、nrawmilk，infantformulaAandB，andyogurtwereinvestigated.ItwasshownthatTCAisbetterthanHAcforeliminatingofproteinsintheabovefour15samples.Theproteinsin2gofrawmilkcouldbeeliminatedby3mLof100g/LTCA.0.5gofinfantformulaAandBneeds5mLof10g/Land20g/LTCAtoremovetheproteins，resp

4、ectively.For2gofyogurt，3mLof20g/LTCAisenough.Thepresentresearchmayprovidevaluableinformationforprotein-containingsample(suchasrawmilk，infantformulaandyogurt)pretreatment.　　KeywordsRawmilk;Infantformula;Yogurt;Protein;Capillaryelectrophoresis　　1引言　　色谱法分析原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶

5、等乳制品中有益或有害化学成分时，必须除去其中的蛋白以得到准确结果，因为蛋白很容易在色谱柱上产生不可逆吸附，导致柱效下降。牛奶蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白组成，其中酪蛋白约占总蛋白的80%，乳清蛋白约占15%。乳清蛋白是酪蛋白沉淀后上清液中含有的蛋白〖1〗　　饕瑟联乳白蛋白(α-Lac)、β-乳球蛋白(β-Lg)、免疫球蛋白G(IgG)和牛血清白蛋白(BSA)组成。其中α-Lac约占乳清蛋白的3%，β15-Lg约占9%，IgG约占2%，BSA约占1%，其它为非蛋白氮(NPN)〖2〗糜昧磕芊窠鲜种样品中的蛋白去除干净，

6、需分析蛋白沉淀后的样品上清液中是否仍有蛋白残留。因此，有必要建立能够准确测定乳清蛋白中含量较高的α-Lac，β-LgA及β-LgB的方法，以监测去除蛋白前后3种蛋白含量的变化，获知蛋白的去除效果。　　毛细管电泳（CE）法因其非常适合蛋白分析而成为首选方法。常用的CE法一般利用涂层管或裸管，通过往分离缓冲液中添加高分子聚合物以实现蛋白分离〖5，6〗薅渴荨１狙芯拷⒘薈E同时分离并测定α-Lac，β-LgA及β-LgB的方法，考察了HAc和TCA对原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白的去除效果。　　２实验部分　　2.1仪器与

7、试剂　　BeckmanP/ACE5000型毛细管电泳仪（美国Beckman公司），配备紫外检测器；P/ACE工作站；F-33pH/mV型酸度计（北京屹源电子仪器科技公司）；Universal32型离心机（德国Hettich公司）；MilliporeMilli-Elix/RiOs型超纯水器（美国Millipore公司）；旋涡混合器（法国Gilson公司）。　　硼酸（优级纯，铁岭地区开源化工厂）；CsOH·15H2O（99.5%，北京百灵威化学技术有限公司）；冰乙酸(99%)和NaOH（北京化学试剂公司）；羟丙基-β-环糊精(HP

8、-β-CD，分子量：1540g/mol)，聚氧化乙烯(PEO，分子量：4000kg/mol)，α-Lac，β-LgA及β-LgB（Sigma-Aldrich公司）。原料奶采自当地奶牛场，婴儿配方奶粉及大果粒酸奶购于当地超市。　　2g/LPEO储备液：称取0.2gPEO于100