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时间:2018-07-06
《毛泡桐叶中乌索酸的提取分离及反相高效液相色谱分析 》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、毛泡桐叶中乌索酸的提取分离及反相高效液相色谱分析易艳萍,邹盛勤,谢晚彬,陈武【摘要】 目的提取鉴定毛泡桐叶中的乌索酸,并建立其含量测定方法。方法采用“醇提凝析法”新工艺分离制备乌索酸,IR,MS,NMR鉴定其结构。建立反相高效液相色谱测定其含量的方法,色谱柱为KromasilC18柱,流动相为乙腈-甲醇-水-磷酸(体积比168∶682∶150∶1.68),流速0.8ml/min,检测波长210nm,柱温25℃。结果乌索酸在0.92~16.56μg范围内线性关系良好(r=0.9996)。样品乌索酸含量为99.61%,得率为30.5%。结论
2、“醇提凝析法”分离制备乌索酸工艺先进,实用可行,为工业试验生产乌索酸提供了技术条件;RP-HPLC法测定乌索酸含量准确、精密度高、重复性好、线性范围宽,可作为控制乌索酸质量的方法。【关键词】毛泡桐叶乌索酸结构表征反相高效液相色谱 Abstract:Objective:ToextractandidentifyursolicacidfromPauloentosa(Thunb.)Steudleavesandtoestablishadeterminationmethodofursolicacid.Methods:UrsolicacidPaulo
3、entosa(Thunb.)Steudleavesbyadoptinganeethodofethanolextractionandagglutinationseparation,anditsstructureinationmethodofursolicacidinPauloentosa(Thunb.)Steudleavesbyreversed-phasehighperformanceliquidchromtographatographiccolumn(KromasilC18,4.6mm×250mm,5μm),acetonitrile-me
4、thanol-obilephase(168:682:150:1.68,V/V)l/minflo)andthecolumntemperature(25℃)ethodofethanolextractionandagglutinationseparationtoextractursolicacidisadvanced,rational,practicalandfeasible,anditprovidestechnologyconditionforindustrialproductionofursolicacid.RP-HPLCissimplea
5、ndaccurate,ithasgoodrepeatabilityandentosa(Thunb.)Steudleaf;Ursolicacid;Structuralcharacteristics;RP-HPLC 毛泡桐叶为玄参科泡桐属植物毛泡桐Pauloentosa(Thunb.)Steud的叶子〔1〕。泡桐的药用价值我国古代就有记载,《本草纲目》(1578年)记有“桐叶主恶蚀疮着阴皮主五痔、杀三虫,花主傅猪疮,消肿、生发。”泡桐的花、叶、果、木、皮、根均可入药〔2〕。泡桐叶含桃叶珊瑚苷、泡桐苷、毛蕊花苷、异毛蕊花苷、糖苷、多酚类〔2〕
6、及熊果酸、乙酰熊果酸α,β〔3〕等,其中三萜酸类,特别是乌索酸和齐墩果酸,具有抗菌、抗肝炎、抗肿瘤、降血糖血脂、增强免疫功能等多种药理作用,已引起人们广泛的关注〔5,6〕。为此,我们以毛泡桐叶为原料,采用“醇提凝析法”提取分离乌索酸〔5,6〕,并建立RP-HPLC测定分析乌索酸含量的方法,为开发利用丰富的毛泡桐药用植物资源提供科学依据。 1器材与方法 1.1材料 毛泡桐叶采自江西宜春市宜春学院北校区,经江西省天然药物活性成分研究重点实验室鉴定为紫花毛泡桐P.tomentosa(Thunb)Steud的叶子。95%乙醇(食用级,南昌利
7、康药械实业有限公司);“YCXY-1号”除杂剂(自制);复合酶制剂(哈尔滨神农有限公司);活性炭(分析纯,上海豪申化学试剂有限公司);甲醇(色谱纯,天津市大茂化学试剂厂);水为超纯水;乌索酸对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号110742-200314)。 1.2仪器B-10D高纯水机(杭州永洁达膜分离设备厂),CP225D电子分析天平(德国Sartourius公司),FW100型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司),202-26A型数显电热恒温干燥箱(上海阳光实验仪器有限公司)。 1.3乌索酸的提取分离 1.3.1工艺流
8、程见图1。 1.3.2操作步骤采用“醇提凝析法”提取分离。将干燥后的毛泡桐叶10kg粉碎成粗粉(20目),用温水湿润,加入原料干重1%的复合酶制剂,38℃酶解处理24h,滤干,加入8倍重量9
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