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1、大叶紫株中乌索酸的提取纯化与反相高效液相色谱分析论文袁琳，邹盛勤，谢晚彬，陈武【摘要】目的提取纯化大叶紫株叶中的乌索酸，并建立其含量测定方法。方法采用“醇提凝析法”提取纯化乌索酸，IR、MS、NMR鉴定其结构。建立反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定其含量的方法，色谱柱为SymmetryShieldRP18柱，流动相为甲醇-水（体积比88∶12）.freell/min，检测波长210nm，柱温25℃。结果乌索酸在4.5～22.5μg范围内线性关系良好（r=0.9998），RP-HPLC测定样品乌索酸含量为98.30%，得率
2、为0.376%。结论“醇提凝析法”提取乌索酸工艺实用可行，为工业试验生产乌索酸提供了技术条件；RP-HPLC法测定乌索酸含量准确、精密度高、重复性好、线性范围宽，可作为控制乌索酸质量的方法。【关键词】大叶紫株叶乌索酸结构表征反相高效液相色谱Abstract：ObjectiveToextractandpurifyursolicacidfromCallicarpamacrophyllaVahlleavesandtoestablishadeterminationmethodforursolicacid.MethodsUrsolic
3、acidCallicarpamacrophyllaVahlleavesbymethodofethanolextractingandagglutinationseparating,anditsstructureinationmethodofursolicacidinCallicarpamacrophyllaVahlleavesbyreversed-phasehighperformanceliquidchromtographatographiccolumn(SymmetryShieldRP18),methanol-obileph
4、ase(88:12,V/V)l/minflo)andthecolumntemperature(25℃)ethodofethanolextractingandagglutinationseparatingtoextractursolicacidisadvanced,rational,practicalandfeasible,anditprovidedtechnologyconditionforindustrialproductionforursolicacid.RP-HPLCissimple,accurate,repeatab
5、leandacrophyllaVahlleaf;Ursolicacid;Structuralcharacteristics;RP-HPLC大叶紫株CallicarpamacrophyllaVahl.为马鞭草科紫株属植物，以根、茎、叶入药。大叶紫株为灌木，生于海拔110～2000m的山坡路旁、疏林下或灌丛中。我国主要分布于广东、广西、贵州、云南、湖南、江西等省。其味苦、微辛，性平，具有散瘀止血、消肿止痛的功效,主治咯血、吐血、便血、创伤出血、跌打瘀肿、风湿痹痛等症，为民间止血要药［1］。胡氏报道马鞭草科紫株属植物紫株Calli
6、carpapedunculataR.BroacrophyllaVahl.的叶为原料，采用“醇提凝析法”提取分离乌索酸［3，4］，并建立RP-HPLC测定分析乌索酸含量的方法，为开发利用大叶紫株药用植物资源提供科学依据。1器材1.1材料大叶紫株叶采自江西省奉新县甘坊乡，经江西省天然药物活性成分研究重点实验室鉴定为大叶紫株CallicarpamacrophyllaVahl.的叶子。95%乙醇（食用级，南昌利康药械实业有限公司生产）；“YCXY-1号”除杂剂（自制）；复合酶制剂（哈尔滨神农有限公司生产）；活性炭（分析纯，上海豪申化
7、学试剂有限公司生产）；甲醇（色谱纯，天津市大茂化学试剂厂生产）；水为超纯水；乌索酸对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号110742-200314）。1.2仪器B-10D高纯水机(杭州永洁达膜分离设备厂)，CP225D电子分析天平(德国Sartourius公司)，F］.上海：上海科技出版社,1996：5928.［2］胡益明,沈月毛,顾琼仙,等.中药紫株的化学成分研究［J］.中草药,2001,32(12)：1063.［3］李开泉,陈武,熊筱娟,等.乌索酸的化学研究概况［J］.宜春医专学报,2001,13(2)：128［4］陈
8、武,李开泉,熊筱娟,等.陆英抗肝炎活性成分的研究［J］.宜春医专学报,2000,12(4):239.［5］丛浦珠.质谱学在天然有机化学中的应用［M］.北京：科学出版社,1987：684.［6］彭师奇.药物的波谱解析［M］.北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1998：10
