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1、PUMA在大鼠胰腺移植缺血-再灌注损伤中的意义崔海宁张克君王正文【摘要】 目的 探讨PUMA在移植胰腺缺血再灌注损伤中的早期促凋亡作用。方法 对封闭群大鼠建立大鼠腔静脉内分泌引流、肠道外分泌引流的动物模型.再灌注后第0、1、2、3、4、6、9、12h等时点,每时点处死5只大鼠,切取移植胰腺,石蜡包埋切片,原位DNA缺口末端标记(TUNEL)法测定胰腺组织细胞凋亡,Westernblot方法测定移植胰腺组织PUMA,bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达.结果再灌注术后第0、1、2、3、4、6、9、12h,胰腺细胞凋亡数分别为(29.42±4.93)、(47.65±6
2、.43)、(74.8±9.73)、(106.35±16.8)、(148.71±19.50)、(123.96±15.54)、(97.32±10.6)和(57.42±9.56)个/高倍视野。各时点均显著高于正常胰腺23.48±4.26。第4小时细胞凋亡数明显增高,12小时降低到最低值,不同组细胞凋亡数的差异有统计学意义(v=42t=2.785P<0.01);PUMA以及其下游的bax和caspase-8蛋白表达在第4小时达到最高峰,12小时降低到最低值,bcl-2在第4小时达到最低值,蛋白表达差异分别有统计学意义(P<0.05),以后逐渐升高,12小时降低到最低值,PUMA表达
3、与各时点的细胞凋亡数有明显的正相关(n=5,r=1.00,p<0.05)结论 I/RI后细胞早期凋亡与PUMA活化有关,PUMA是通过调节下游bax、caspase-8、bcl-2基因发挥凋亡促进作用【关键词】 胰腺移植;缺血再灌注损伤;凋亡;PUMA蛋白; TheeffectofPUMAexpressioninRatpancreaticallograftsduringischemia-reperfusioninjuryZHANGKe-jun,LIDe-chunZhuXing-Guo,etal.TheFirstAffiliatedHospitalofSoochowUnive
4、rsity,Generalsurgery,SuhouChina215006.作者单位:张克君,李德春,朱兴国,朱东明苏州大学第一附属医院普外科215006【Abstract】 Objective Tostudythepro-apoptosiseffectofPUMAproteininpancreaticallograftsduringischemia-reperfusioninjury.MethodsSDandWistarratswereusedasdonorsandrecipients.Toestablisharatmodelofpancreasticoduodenalt
5、ransplantationwithvenacavadrainageandentericdrainage.At0,1,2,3,4,6,9,12haftertransplantation,5animalsweresacrificedateachtimepointineachgroup.ThepancreaticgraftswereremovedforapoptosicanalysisbyusingTUNELassay,andtheproteinofPUMA,bcl-2、bax、caspase-3wasanalizedbyusingwesternblot.Results The
6、numberofapoptosiccellsinpancreaticgraftswas(29.42±4.93)、(47.65±6.43)、(74.8±9.73)、(106.35±16.8)、(148.71±19.50)、(123.96±15.54)、(97.32±10.6)and(57.42±9.56)/400×fieldrespectively;Thenumberofapoptosiccellsin4hweresignificantlyincreasedascomparedwiththeothergroupsateachtimepoint,and.significantl
7、ydecreasedin12h.(v=42t=2.785P<0.01).TheexpressionofPUMAanditsdownstreamingbaxandcaspase-3weresignificantlyincreasedat4h,anddecreasedat12hafterreperfusion,andbcl-2wassignificantlydeincreasedat4h,andincreasedat12hafterreperfusion(P<0.05).Theapoptosiccellsateacht
