高效液相色谱法测定楤木及其提取物中齐墩果酸的含量的论文

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1、高效液相色谱法测定楤木及其提取物中齐墩果酸的含量的论文作者：田吉，李翅翔，何兵，肖顺汉【摘要】　　目的建立楤木及其提取物中齐墩果酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱（hplc）法，色谱柱为kromasilc18柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-水（95∶5），检测波长210nm，柱温30℃；流速1.0ml·min-1；进样量10μl。结果齐墩果酸在0.502～4.016μg范围内与峰面积具有良好的线性关系（r＝0.9999），平均回收率96.38%，rsd为1.17%。结论该方法灵敏、准确，可用于楤木及其提取

2、物的质量控制。【关键词】楤木；提取物；齐墩果酸；含量测定；高效液相色谱法　　abstract：objectivetoestablishamethodforthedeterminationofoleanolicacidinrootbarkofaraliaanditsextracts．methodsakromasilc18column(250mm×4.6mm，5μm)obilephaseconsistingofmethanol-.thecolumntemperaturel·min-1，andthesamplevolumeethodi

3、ssensitive，accurate，andissuitableforthequalitycontrolofrootbarkofaraliaanditsextracts．　　keyination；hplc　　楤木，又称楤木白皮，为五加科楤木属植物楤木araliachinensisl.的根皮，具有祛风湿，利小便，散淤血，消肿毒的功效［1］。.全国各地以多种楤木属植物的根皮作楤木入药，常见的有楤木、太白楤木、辽东楤木、黄毛楤木等种。楤木属植物的主要有效成分为楤木皂苷，苷元为齐墩果酸。楤木皂苷具有适应原样作用，以及中枢神经抑制、强心

4、、降血脂、降血糖和降血压、抗癌等多种药理作用［2，3］。但目前国家尚无楤木皂苷的法定对照品，为控制质量，本实验采用高效液相色谱法，以苷元齐墩果酸为指标，测定了楤木药材及其提取物楤木总皂苷的含量。　　1仪器与试药　　1.1仪器　　戴安高效液相色谱仪（p680a四元低压梯度泵，pda-100二极管阵列检测器，tcc-100柱温箱，chromeleon色谱工作站）；瑞士precisa电子天平（xr205sm-dr）。　　1.2试药　　辽东楤木，购至安徽亳州药材市场，产地辽宁，楤木，采至四川省泸州市纳溪区龙车乡，经泸州医学院生药教研室鉴

5、定分别为辽东楤木araliaelata(miq.)的及楤木araliachinensisl.的根皮。楤木总皂苷，由泸州医学院药物研究所自制。齐墩果酸对照品（110781-200512），中国药品生物制品检定所提供，经hplc峰面积归一化法计算纯度在98％以上。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1色谱条件　　色谱柱为dikmakromasilc18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇-水（95∶5）；检测波长为210nm；柱温为30℃；流速为1.0ml·min-1；进样量10μl。

6、　　2.2对照品溶液的制备　　精密称取齐墩果酸对照品5mg，加甲醇25ml制成0.2mg·ml-1的对照品溶液（实际0.2008mg·ml-1）。　　2.3供试品溶液的制备　　2.3.1楤木药材供试品溶液的制备　　精密称取药材细粉0.2g，加入25ml甲醇，回流提取4h，过滤，少量甲醇洗涤，合并滤液，水浴挥去甲醇，加20ml10%稀硫酸，水浴回流4h，氯仿60ml分5次萃取，合并萃取液，10ml水洗后水浴蒸干，加甲醇溶解并定容到10ml。　　2.3.2楤木提取物供试品溶液的制备　　精密称取总皂苷0.2g，加入20ml10%稀硫酸

7、，水浴回流4h，氯仿60ml分5次萃取，合并萃取液，水浴蒸干，加入甲醇定容到25ml，精密量取1ml，用甲醇定容至10ml。　　2.4　系统适应性实验分别精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱图，结果见图1～4。在试验条件下，齐墩果酸与其相邻色谱峰的分离度大于1.5，理论塔板数以齐墩果酸峰计均大于10000，溶剂无干扰。　　2.5线性关系考察　　精密吸取齐墩果酸对照品溶液(0.2008mg·ml-1)2.5，5，7.5，10，15，20μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测

8、定峰面积，以峰面积a对进样量c（μg）进行回归，回归方程为：a=8.1354c－0.0122，r=0.9999。齐墩果酸在进样量0.502～4.016μg范围内，峰面积与进样量有良好的线性关系。　　2.6精密度实验分别取“2.2”项下对照品溶液10μl，按上述色