益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中ed1及nf

《益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中ed1及nf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中ED1及NF作者：孙世竹孙伟王继明,陈继红,赖仁胜朱萱萱【摘要】目的探讨依据益肾活血清利法组方对uuo(单侧输尿管梗阻大鼠模型)大鼠的肾间质中ed1及nf-κb表达的影响。方法制备单侧输尿管梗阻大鼠模型，随机分为假手术组、模型组、益肾活血清利方组、益肾活血清利方高剂量组、苯那普利组。观察对术后21天大鼠肾间质ed1及nf-κb表达的影响。结果中药各组较模型组大鼠肾间质ed1及nf-κb的表达差异均有显著性;苯那普利组对ed1的表达与模型组比较差异有显著性。结论益肾活血清利方对肾间质纤维化过程中ed

2、1及nf-κb表达具有良好的防治作用，苯那普利组可以抑制uuo大鼠肾间质ed1的表达。【关键词】益肾活血清利方;单侧输尿管梗阻(uuo);ed1(巨噬细胞);nf-κb(核转录因子)[abstract]objectivetoidentifyportantroleinvivoinpreventingthedevelopmentoftubulointerstitialfibrosisafterunilateralureteralobstructioninrats.methodstoestablishtheuuomodelinvivo，ther

3、atslydividedintofivegroups：shamopermiongroup，modelgroup，theyishenhuoxueqinglichinesemedicinegroup，thehighdosagechinesemedicinegroupandthebenazeprilgroup.after21daystheexpressionofed1andnf-κbmunohistochemistry.resulttheexpressionlevelofed1andnf-κbintheuuogroupedicinegroup(

4、p<0.01),thehighdosechinesemedicinegroup,andthebenazeprilgroupisgraduallyloedicinegroupplaysaremarkablypreventiverole(p<0.01)，thebenazeprilgroupisnotsignificant.thehighdosechinesemedicinegroupcandecreasetheexpressionofnf-κb;conclusionyishenhuoxueqinglirecipecouldredu

5、cetheexpressionofed1andnf-κbinmacekidneyacekidney.　　[keyl含生药1g(低剂量)、2g(高剂量)，由江苏省中医院制剂室制备。盐酸苯那普利(洛汀新)由北京诺华制药有限公司生产，市售。　　1.3实验仪器leica光学显微镜(型号：dmls2)。　　1.4实验试剂ed1一抗为鼠抗鼠巨噬细胞ed1(cd68)单克隆抗体，chemiconinternational(aserologicalcpany)，美国。nf-κb一抗为核转录因子nf-κb单克隆抗体，二抗为辣根过氧化酶(hrp)标记的链菌素

6、抗生物素igg(hrp-polymergoatanti-ms/rbigg)，福州迈新生物技术开发有限公司。磷酸盐缓冲液pbs、dab显色液，均为福州迈新生物技术开发有限公司。　　2方法　　2.1造模及给药方法将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾活血清利方组、益肾活血清利方高剂量组(2ml/100g)、苯那普利组(45mg/kg)，提前1天给药，每天2次灌胃。以2%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，行左侧输尿管结扎术[1]。无菌手术打开腹腔，分离右侧输尿管,在肾盂处和输尿管上1/3处用3号线双重结扎输尿管，分层缝合关闭腹腔;假

7、手术组仅将输尿管游离但不结扎。术后21天称重后处死大鼠，留取梗阻侧肾脏标本，置于10%中性甲醛固定液中保存，用以作有关病理检查。　　2.2肾组织标本ed1及nf-κb免疫组化检查免疫组化在江苏省中医院病理科进行。采用改良sp法：(1)脱蜡修复液修复10min，微波450in，自来水冷却，pbs洗3次，各2min。(2)加羊血清孵育10min，加第一抗体，室温1h，pbs洗3次，各2min。(3)加第二抗体，室温15min，pbs洗3次，各2min。(4)dab显色液显色，水洗;苏木素复染1min，水洗;(5)1%盐酸酒精分化数秒，各级酒精

8、脱水，二甲苯透明。(6)中性树胶封固，光镜下观察。　　肾小管间质ed1及nf-κb免疫组化染色阳性面积测定：在光学显微镜(×400倍)宁阙病理计算机图像分析系统屏幕上计算每例切片20个不重叠视