菱角皮提取物中鞣酸类化合物的含量测定及其指纹图谱研究的论文

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时间:2018-05-08

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1、菱角皮提取物中鞣酸类化合物的含量测定及其指纹图谱研究的论文作者:符少莲,周光雄,黄美燕【摘要】目的建立菱角皮醋酸乙酯提取物中鞣质类化合物的hplc含量测定方法,并对提取物hplc指纹图谱条件进行研究分析。方法采用反相c18柱(4.6mm×200mm,5μm),甲醇-0.5%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为25℃,流速为0.8ml/min,在276nm下进行检测。结果菱角皮醋酸乙酯提取物中鞣质类化合物1,2,6-三没食子酰-β-d-葡萄糖的含量为85.7mg/g,加样回收率为92.49%;1,2,4,6-四没食子酰-β-d-葡萄糖

2、的含量为244mg/g,加样回收率为96.41%;初步探讨了菱角皮提取物的指纹图谱条件。结论采用高效液相法测定菱角皮醋酸乙酯提取物中鞣质类化合物的含量,简便、快速、准确;初步得到分离菱角皮提取物各特征峰的色谱条件,为以后建立指纹图谱和制定菱角皮药材及其活性提取物的质量标准提供了依据。【关键词】菱;果皮;鞣酸;高效液相色谱;指纹图谱  abstract:objectivetoestablishdeterminationmethodoftanninpoundsfrombioactiveethylacetateextractofthefr

3、uitcrustoftrapabispinosaroxbbyhplc,andtostudyonanalysisconditionsofhplcfingerprintoftheextract.methodsusereversephasec18column(4.6mm×200mm,5μm),detection,columntemperatureat25℃,flol/min,andgradientaqueousmethanolsolutioncontaining0.5%aceticacidasamobilephase.resultsthe

4、determinationoftannicacidpound1,2,6-tri-galloyl-β-d-glucosefromtheextractg/g,andtheaveragerecoveriesinationoftannicacidpound1,2,3,6-tetra-galloyl-β-d-glucoseg/g,andtheaveragerecoveriesinarystudyonconditionsofhplcfingerprintforthebioactiveextractinationmethodforthetanni

5、npoundsfromethylacetateextractofthefruitcrustoftheplantbyhplcissimple,fastandaccurate.chromatographicconditionsofethylacetateextractoftheplantentofthehplcfingerprintandmakingqualitystandardofthecrudedruganditsbioactiveextractfromtheplant.  keyanshuricaflerov菱角的提取物确实有一定

6、的抗肿瘤活性[3~5]。在我们的前期工作中,选取菱trapabispinosaroxb的菱角皮作为研究对象,采用mtt法对菱角皮提取物抗肝癌hepg2细胞活性成分进行活性追踪,采用液-液萃取提取物各极性部位,也证实了菱角皮醋酸乙酯提取物对hepg2细胞有一定的抑制作用;采用反相c18柱层析和sephadexlh-20排阻层析分离活性成分,得到两个鞣质类化合物1,2,6-三没食子酰-β-d-葡萄糖(1)和1,2,4,6-四没食子酰-β-d-葡萄糖(2),对该两个化合物进行了抗癌活性实验,证实其对hepg2细胞有一定的抑制作用(待发表)

7、。此前,有研究表明存在于东北菱菱角中的没食子酸具有诱导hela肿瘤细胞凋亡的作用[3]。两个化合物化学结构式见图1。本研究将对菱角皮的醋酸乙酯活性部位中鞣质类化合物进行hplc定性定量方法研究,旨在建立hplc含量测定方法,并对菱角皮醋酸乙酯提取物hplc指纹图谱条件进行研究分析。  1仪器与材料  1.1仪器agilenttechnologies1200series高效液相色谱仪,电子天平(acculabsartoriusgroup),旋转蒸发仪(eyela)。  1.2药材菱壳为从湖南长沙购买的菱角(第1批)、江西采集的菱角(第

8、2批)和购买的菱角(第3批)果实去肉后的硬壳,药材经暨南大学药学院生药学教研室鉴定为菱trapabispinosaroxb的果壳。药材样品留存于暨南大学药学院生药学教研室。  1.3标准品1,2,6-三没食子酰-β-d-葡萄糖(1)、

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