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时间:2018-05-07
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1、肾气丸“阴中求阳”配伍对丹皮酚含量的影响:李政木卓廉佳陈炜璇吴勇【摘要】目的测定丹皮酚在肾气丸各拆方组水煎液中的含量,分析肾气丸“阴中求阳”配伍对丹皮酚含量的影响。方法将肾气丸组方药物拆方分为补阳组1、补阳组2、补阴组1、补阴组2、阴阳双补组1和阴阳双补组2(即肾气丸全方),采用高效液相色谱法测定各肾气丸拆方组水煎液中丹皮酚的含量。结果阴阳双补组2水煎液中丹皮酚含量高于补阳组2和阴阳双补组1;阴阳双补组1和补阳组2水煎液中丹皮酚含量高于补阳组1,且都具有统计学意义。结论肾气丸“阴中求阳”配伍能增大水煎液中丹皮酚的含量,且肾气丸中
2、的“三泻”药物(茯苓、泽泻、丹皮)也有增强此作用的趋势。【关键词】肾气丸;阴中求阳;丹皮酚;高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveTodetectthecontentofpaeonolindecoctionofeachdismantleddruggroup,andtoanalyzetheinfluenceofpatibilityofShenqiPillYin”onthecontentofpaeonolineachdecoction.MethodsThedrugofShenqiPillantledShenqiPilldecoctionea
3、seuredbyusingthemethodofhighperformanceliquidchromatogram.ResultsTheinvigoratingYingroupⅡandtheYin”. KeyYin;Paeonol;Highperformanceliquidchromatogram 肾气丸始载于《金匮要略》,由桂枝、附子、干地黄、山茱萸、山药、茯苓、泽泻、牡丹皮组成,有温补肾阳之功效,是临床治疗肾阳虚证的名方。其“阴中求阳”的组方原理,即在大量滋阴补肾的药物中加入少量的附子、桂枝,是方剂现代研究中值得探讨的课题。本研究将肾气丸的组方
4、进行拆分,以丹皮酚的含量为指标,对肾气丸各拆方组水煎液中丹皮酚的含量进行比较研究。现报道如下。 1仪器与材料 1.1仪器DIONEXP680高效液相色谱仪;UVD170U型紫外可见光检测器;Chromeleon工作站;分析天平;超声清洗仪。 1.2试剂乙醚;甲醇;水;乙腈(色谱纯);其他试剂均为达到色谱分析标准。 1.3对照品丹皮酚(中国药品生物制品检定所,批号为110708-200505)。 1.4药材桂枝、附子、干地黄、山药、山茱萸、茯苓、泽泻、牡丹皮均由广州中医药大学中药鉴定教研室张丹雁教授鉴定为正品。 2方法与结果 2.1拆方分组
5、将肾气丸组方药物分为补阳组1:附子,桂枝;补阳组-2:附子,桂枝+茯苓,泽泻,丹皮;补阴组1:干地黄,山茱萸,山药;补阴组2:干地黄,山茱萸,山药+茯苓,泽泻,丹皮;阴阳双补组1:附子,桂枝+干地黄,山茱萸,山药;阴阳双补组2:即肾气丸全方。其中含有牡丹皮的组有:补阳组2,补阴组2,阴阳双补组-2。 2.2高效液相色谱条件色谱柱DiomonsilTMC18(5μm,4.6mm×250mm);柱温为室温;流动相为乙腈水(50:50),流速1ml/min;检测波长274nm;进样量10μl。 2.3标准曲线制备精密称取丹皮酚对照品23.
6、3mg,置50ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度(每毫升含丹皮酚0.466mg),作为对照品储备溶液。分别精密量取对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2ml,置25ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,制得不同浓度的丹皮酚对照品溶液,取上述标准溶液,按文中报道的色谱条件分别进样10μl测定,以丹皮酚标准液浓度为横坐标(C),峰面积为纵坐标(A),得回归方程A=0.769C-0.3529,r=0.9999丹皮酚在3.728~22.368μg/ml内线性关系良好,符合外标法定量测定要求。 2.4供试品溶液的制备精密称取各肾气丸拆方组含丹皮6g
7、(以桂枝、附子、干地黄、山茱萸、山药、茯苓、泽泻、牡丹皮1∶1∶8∶4∶4∶3∶3∶3的比例计算),浸泡30min,煎煮60min,得药液约15ml,用乙醚萃取两次(15ml/次),室温挥干乙醚,残渣用甲醇溶解定容至5ml,用0.45μm的有机微孔滤膜滤过,取续滤液即得。 2.5精密度实验取对照品溶液,连续进样测定,根据所得峰面积计算,RSD=1.05%(n=6)。 2.6稳定性实验取供试品溶液在室温下放置,每隔2h测定1次,共进样5次。结果表明,丹皮酚峰面积积分值在8h内稳定。补阳组2RSD=1.46%,补阴组2RSD=1.3%;阴阳双补组
8、2RSD=0.74%(n=5)。 2.7阴性对照实验肾气丸全方按照含丹皮6g的比例称取不含丹
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