肾气丸“阴中求阳”配伍对肾阳虚大鼠下丘脑多巴胺及五羟色胺含量的影响论文

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1、肾气丸“阴中求阳”配伍对肾阳虚大鼠下丘脑多巴胺及五羟色胺含量的影响论文吴勇，李政木，卓廉佳，陈炜璇，范明威【摘要】目的用肾气丸各拆方组水煎液灌胃肾阳虚大鼠，测定灌胃后各组大鼠下丘脑中多巴胺（DA）、五羟色胺（5-HT）的含量，分析肾气丸“阴中求阳”治疗肾阳虚证的机理。方法以氢化可的松25mg/(kg·d）注射大鼠，连续12d.freelYin"onthecontentsofDA,5-HTinhypothalamusofdeficientkidney-yangRats.MethodsTheratsg/(kg·d)forconsecutive12daysandadmi

2、nsteredantleddecoctionatthesametime.Onthe21stday,theratsuseasuredbythemethodofhighperformanceliquidchromatogram.Resultsparedalgroup,thecontentsofDA,5-HTodelgroup.Afterintragastricadministration,thecontentofDA,5-HTineachdismantledgroupus.Thefirstgroupofinvigoratingyin-yangusislikelytob

3、ethemechanismbyebythepatibilityof"reinforcingyangfromyin".Keyyin;Kidney-yangastheniasyndrome;DA；5-HT;HPLC肾气丸是临床治疗肾阳虚证的名方，方由大量滋阴补肾的药物配伍少量的桂枝、附子而成，以“阴中求阳”微微生火以治疗肾阳虚证。为分析肾气丸此种“阴中求阳”配伍治疗肾阳虚证的药效机理，本研究以氢化可的松制作大鼠肾阳虚模型，观察肾气丸及其各拆方组水煎液灌胃大鼠后，比较各组大鼠下丘脑神经递质多巴胺（DA）、五羟色胺（5-HT）的含量变化。现报道如下。1材料与仪器1.1动物

4、健康SPF级雄性SD大鼠88只，体质量200g左右，广东省实验动物中心提供［质量合格证编号:0026197,许可证号：SCXK（粤）2003-0002粤监证字2007A003］。正常光照，自由饮水、摄食，适应性喂养5d后，随机分为正常组（A组）、模型组（B组）、补阳1组（C组）、补阳2组（D组）、补阴1组（E组）、补阴2组（F组）、阴阳双补1组（G组）、阴阳双补2组（H组），共8组，每组11只。1.2仪器日立CR22G低温高速离心机；DIONEXSummit高效液相色谱仪（美国DIONEX公司），Chromeleon色谱工作站（美国DIONEX公司），HP1049

5、A电化学检测器（美国安捷伦公司），玻璃碳工作电极和Ag/AgCl参比电极，PHS-2C精密酸度计（上海理达仪器厂），分析天平(万分之一，北京赛多利斯天平有限公司)。1.3试剂氢化可的松（天津金耀氨基酸有限公司批号：0612011），乌拉坦（国药集团化学试剂有限公司批号120060323），多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）均购自sigma公司，乙腈购自美国TEDIA公司，其余试剂均为市售分析纯。1.4药物分组肾气丸组方药材（经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定为正品），补阳1组（C组）：附子、桂枝；补阳2组（D组）：附子、桂枝＋茯苓、泽泻、丹皮；补阴1组（E组）

6、：干地黄、山茱萸、山药；补阴2组（F组）：干地黄、山茱萸、山药＋茯苓、泽泻、丹皮；阴阳双补1组（G组）：附子、桂枝＋干地黄、山茱萸、山药；阴阳双补2组（H组）：即肾气丸组：附子、桂枝、干地黄、山茱萸、山药、茯苓、泽泻、丹皮；其中药物附子、桂枝、干地黄、山茱萸、山药、茯苓、泽泻、丹皮组成比例为1∶1∶8∶4∶4∶3∶3∶3（按原方比例）。2方法和结果2.1给药与取材除正常组大鼠外，其余大鼠均每天大腿内侧肌肉注射氢化可的松25mg/kg，连续12d，同时开始灌胃（药量按体表面积法［1］折算为成人用量的5倍，灌胃体积1ml/100g）给药，正常组、模型组给予等体积生理盐

7、水，连续给药20d。于给药第21天上午8时，以乌拉坦（剂量1g/kg）麻醉大鼠，迅速取出大鼠全脑，分离出下丘脑，称重，以5%高氯酸匀浆，低温高速离心（-4℃15000r/min）30min，分取上清液，存于-80℃冰箱待测。2.2色谱条件色谱柱为DevelosilC30-UG-5（150mm×4.6mm,.freel，日本NomuraChemicalCo.,Ltd）；流动相为磷酸二氢钾溶液（25mmol/L，内含乙二胺四乙酸二钠0.5mmol/L，用磷酸调pH3.4）∶乙腈=95∶5（体积比），用前经0.45μm滤膜真空抽滤，流速0.5ml/min；玻璃碳工作电极

8、，Ag/A