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《苦参碱对肝卵圆细胞增殖模型大鼠notch1,jagged1mrna表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、苦参碱对肝卵圆细胞增殖模型大鼠Notch1,Jagged1mRNA表达的影响【关键词】苦参碱；肝；卵母细胞；大鼠；Thy EffectofmatrineonexpressionsofNotch1,Jagged1mRNAinhepaticovalcellproliferationmodelrats 【Abstract】AIM:TostudytheexpressionsofNotch1,Jagged1mRNAinhepaticovalcellproliferationmodelratsandtheeffectofmatrineonth
2、em.METHODS:FortyeightmaleSDratslyseparatedinto4groupsaccordingtobodymass:modelgroup(groupA),loatrinegroup(groupB,5mg/100g),highdosematrinegroup(groupC,25mg/100g),controlgroup(groupD).TheexpressionofThy1proteinehistochemisty,andtheexpressionsofNotch1,Jagged1mRNAiquantita
3、tiveRTPCRmethod.RESULTS:paredRNA,Jagged1mRNAingroupARNA,Jagged1mRNAingroupCightbeoneofthemechanismsofinhibitingtheproliferationofhepaticovalcellsandinducingrathepaticovalcellstodifferentiateintomaturehepatocytes. 【Keyatrine;liver;oocytes;rats;Thy1;Notch1 【摘要】目的：研究肝卵圆细
4、胞增殖模型大鼠Notch1,Jagged1mRNA表达的变化及苦参碱对其的影响.方法：雄性SD大鼠48只按体重随机分为4组：模型组（A组）；苦参碱小剂量（B组）；苦参碱组大剂量(C组)；D组即正常对照组.用免疫组化方法观察造血干细胞标记(Thy1)表达的变化、半定量RTPCR方法观察肝组织中Notch1,Jagged1mRNA表达的变化.结果：与D组比较，A组Thy1蛋白,Notch1mRNA,Jagged1mRNA表达显著升高（P0.01）,与A组比较,C组Thy1蛋白,Notch1mRNA,Jagged1mRNA表达显著下调（P0
5、.01）.结论：苦参碱可有效的调节Notch信号通路、下调Thy1蛋白表达，可能是其抑制卵圆细胞过度增殖、诱导卵圆细胞向肝细胞方向定向分化的机制之一. 【关键词】苦参碱；肝；卵母细胞；大鼠；Thy1；Notch1 0引言 卵圆细胞作为肝脏的干细胞在肝细胞损伤修复及癌变过程中起重要作用，但目前关于卵圆细胞的来源、特性、分化增殖的调控机制尚不十分清楚.研究证实多种细胞因子参与了卵圆细胞分化发育的调节过程〔1-2〕.本实验建立了大鼠肝卵圆细胞增殖模型，观察了卵圆细胞在肝组织内的分布及Notch1,Jagged1mRNA在该模型中的表达
6、情况，并探讨了苦参碱对其的作用. 1材料和方法 1.1材料苦参碱标准品购自中国药品生物制品检定所，二乙酰氨基芴（2AAF）购自Sigma公司，兔抗大鼠Thy1IgG购自SantaCruz公司，Notch1,Jagged1引物由上海生物工程公司合成，Trizol总RNA提取试剂盒,dNTPs,Oligo(dT)15Primer,MMLV逆转录酶、TagDNA聚合酶均为美国Promega公司产品.雄性SD大鼠48只，体质量130±20g,由河北医科大学实验动物中心提供. 1.2方法雄性SD大鼠48只随机分为模型组（A组），苦参碱小剂
7、量组（B组，按每100g大鼠5mg苦参碱灌胃），苦参碱大剂量组(C组，按每100g大鼠25mg苦参碱灌胃),正常对照组（D组）.A,B,C组饲以含0.15g/L二乙酰氨基芴（2AAF）饲料1,1RNA表达水平.总RNA抽提：应用Trizol(一步法)总RNA提取试剂盒提取肝组织总RNA，采用分光光度法测定提取的总RNA含量及纯度，A260/A280之间，计算出提取总RNA浓度.反转录：按Promega公司CDNA合成试剂盒说明操作，取RNA15μg,MMLV反转录酶1μL，总反应体积25μL,37℃反转录50min,95℃5min灭活
8、反转录酶.引物设计：Notch1mRNA引物序列参照YujiNishikaRNA引物序列参照CharlotteHJ等〔4〕发表的文献：上游:5＇atgcggtccccacggacgcg3＇，下游:5＇acactcagga
