加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤保护作用及其机理研究

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1、加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤保护作用及其机理研究：马小娟，颉东升，何国梁【摘要】目的观察加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤的保护作用以阐明其药效和药物作用机理。方法采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤模型，观察本方对肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)活性，脾、肝脏器系数，肝脏病理组织学损伤程度的影响，并检测小鼠肝组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量，血清一氧化氮(NO)含量及肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量。结果加味茵陈五苓散和阳性对照药物五酯片均能显著降低BCG/LPS免疫性肝损伤小鼠血清中升高的ALT、AST水平;且

2、加味茵陈五苓散中剂量降酶作用优于阳性对照组;对肝脾重量的增大有显著的抑制作用;组织病理检查结果显示本品中、高剂量可减轻肝组织坏死范围及程度，减少炎细胞浸润，有明显的保肝作用。同时发现中剂量药物可显著降低肝匀浆中升高的MDA水平，提高肝匀浆SOD水平，显著降低血清中升高的NO含量和TNF-α含量。结论加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤具有保护作用，其机制可能与其直接清除自由基、降低脂质过氧化物水平、提高SOD活性、减少炎性细胞因子的产生和调节机体免疫功能等有关。【关键词】加味茵陈五苓散;卡介苗(BCG);脂多糖(LPS);免疫性肝损伤　　Abstract：ObjectiveTostud

3、ytheeffectsofModifiedYinChenethodsModifiedYinChenodifiedYinChenodifiedYinChenodifiedYinchenDAcontentandSODactivityinliverhomogenate,andreducethelevelsofNOandTNF-αinserumobviously.ConclusionModifiedYinchenageinducedbyBCGandLPSinmicebyscavengingoxygenfreeradical,inhibitinglipidperoxidationandr

4、egulatingimmunefunction.　　Keyacodynamic;BacillusofCalmette-Guefinvaccine;Lipopolysaccharide;Immunehepaticinjury　　加味茵陈五苓散为经方茵陈五苓散加减化裁而成，具体药物由茵陈30g，泽泻15g，茯苓15g，猪苓15g，白术15g，白背叶根30g，叶下珠20g(又名：珍珠草)、黄花倒水莲15g组成，即由茵陈五苓散去辛温之桂枝，加入近年来治疗肝炎临床疗效显著的中草药白背叶根、叶下珠(珍珠草)、黄花倒水莲而组成的，全方具有清热利湿，益气健脾，活血化瘀的作用，本复方临床主要用于

5、治疗病毒性肝炎、酒精性肝炎及肝纤维化等肝病，在改善患者肝功能和临床症状方面疗效确切。　　现代研究表明，免疫损害机制在病毒性肝炎尤其是乙型肝炎发病过程中起主要作用。本实验在中医理论指导下，基于以上的研究基础，以卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)所致免疫性肝损伤小鼠为研究对象，观察加味茵陈五苓散对免疫性肝损伤的保护作用，并初步探讨该方防治肝损伤的作用机理，从而为加味茵陈五苓散治疗病毒性肝炎提供实验依据，也为该方的进一步研究打下基础。　　1材料与仪器　　1.1实验动物NIH小鼠，90只，雌雄皆用，体重20～26g，6～8周龄，清洁级，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号2008

6、A015。小鼠在恒温25～28℃，光照正常的环境中进行7d适应性喂养后，分组进行实验。随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、加味茵陈五苓散高、中、低剂量组。　　1.2药物加味茵陈五苓散由白背叶根30g，茵陈30g，泽泻15g，茯苓15g，猪苓15g，白术15g，珍珠草20g，黄花倒水莲15g组成(即茵陈五苓散原方去桂枝，加白背叶根、黄花倒水莲、珍珠草组成。)以上药材由广州中医药大学第一附属医院中药房提供;低、中、高剂量组药液每毫升含复方生药量分别为1.29，2.58，5.16g;五酯片，广西方略药业有限公司生产，批号Z20025766。　　1.3试剂冻干卡介苗制剂(Cal

7、metteGuerinbacillusvaccine，BCG)购自中国生物技术集团公司上海生物制品研究所，批号：20070901;脂多糖(1ipopo-lysaccharide，LPS)为Sigma公司产品，临用前用生理盐水稀释;丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒，批号：20080506;天冬门氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒，批号：20080506;丙二醛(MDA)测定试剂盒，批号：20080419;超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒，批号：20080418;蛋白测定试剂盒(考马斯亮蓝