唑来膦酸联合甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞生长及化疗敏感性研究

《唑来膦酸联合甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞生长及化疗敏感性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、唑来膦酸联合甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞生长及化疗敏感性研究图1ZOL干预MG63细胞体外生长抑制曲线。将1mol/L的MTX母液配置成不同终浓度并分别处理MG63细胞，于加药后48h，72h，96h检测细胞抑制率2.2甲氨蝶呤对人骨肉瘤MG63细胞系生长的抑制作用（见图2）。图2MTX干预MG63细胞体外生长抑制曲线。将1g/L的MTX母液配置成不同终浓度并分别处理MG63细胞，于加药后48h，72h，96h检测细胞抑制率.L.编辑。2.3唑来膦酸与甲氨蝶呤的协同作用（见图3）。图3ZOL联合MTX干预MG63细胞体外生长抑制曲线。将10μm

2、ol／LZOL分别加入1～100mg/L不同浓度的MTX并作用于细胞，于加药后48h，72h，96h检测细胞抑制率以不同浓度的甲氨蝶呤（1～100mg/L）处理细胞，在另一组甲氨蝶呤中每孔加入10μmol／L唑来膦酸联合应用。分别于加药后48h，72h，96h观察结果。发现单用甲氨蝶呤对于骨肉瘤MG63细胞有抑制作用并呈剂量-时间依赖性。其IC50值为50.99mg/L。唑来膦酸单药ZOL组剂量为1μmol/L、10μmol/L时，MG63细胞凋亡率分别为9.91%、48.95%，单用MTX（1、10、100mg／L）时细胞凋亡率为37

3、.68%、45.93%、52.418%，当唑来膦酸(10μmol/L)联合MTX（1、10、100mg／L）时.MG63细胞的凋亡率分别为51.96%、66.77%、69.23%。经卡方检验，联合用药组的凋亡率高于单药组。x2=8.83(P<0.05，见表1)。表1ZOL联合MTX对MG63细胞的生长抑制作用（72h）组别生长抑制率（%）MTX1mg／L37.68MTX10mg／L45.93MTX100mg／L52.42ZOL10μmol/L48.95MTX1mg／L+ZOL10μmol/L51.96MTX10mg／L+ZOL10

4、μmol/L66.77MTX100mg／L+ZOL10μmol/L69.233讨论肿瘤细胞对现有抗癌药物产生耐药性、药物的毒性反应是目前肿瘤化疗失败的主要原因。目前临床上关注的问题是：最理想的药物组合、给药时机、给药顺序和途径以及治疗的时间。二膦酸盐是近年来研发的抗代谢性骨病的一类新药，主要用于治疗骨质疏松症、恶性肿瘤引起的高钙血症、骨痛症等。除具有强大的抗骨吸收功能外，二膦酸盐的抗肿瘤作用也受到越来越多的重视。其抗肿瘤作用主要表现在3个方面：（1）抑制肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡；（2）抑制肿瘤细胞粘附、迁移和侵袭；（3）与放、化疗

5、的协同作用。有研究证实，唑来膦酸对于乳腺癌［1］、前列腺癌［2］、肺腺癌［3］等均有抗肿瘤作用。最近的研究表明二磷酸盐对于骨肉瘤细胞有抗肿瘤作用。唑来磷酸作用于骨肉瘤细胞周期与生长调控的ATM/Chk1/cdc25路径［4］并造成DNA损伤，S期细胞堆积［5、13］。唑来磷酸还可以增强gammadeltaT淋巴细胞对骨肉瘤细胞的杀伤作用［6］。DassCR等［7］用老鼠试验证实骨肉瘤细胞不仅能够抑制肿瘤生长、减少肺转移［8］、减少骨质溶解，还能减少病骨中破骨细胞的数量和肿瘤血管的密度，提示唑来膦酸对于骨肉瘤细胞的生存能力、侵袭性、分化及

6、血管再生能力均有影响。唑来膦酸还可抑制骨肉瘤LM8细胞的体外黏附，迁移和侵袭。［9］与放疗的协同作用方面，有研究证实唑来磷酸和阿霉素、紫杉醇、双氟胞苷合用具有协同效果［10］，增强顺铂对骨肉瘤细胞的细胞毒作用［11］。骨肉瘤动物模型组织学研究显示唑来膦酸和异环磷酰胺合用可诱导肿瘤移植部位的广泛纤维化，表明两药联用可明显促进组织的修复并明显降低骨肉瘤的复发。［12］本次实验采用MTT法证实了唑来膦酸对骨肉瘤MG63细胞增殖有抑制作用，且这种抑制效应与药物浓度、作用时间呈正相关性。将MTX与小剂量化疗药物唑来膦酸联合应用后观察到对MG63细

7、胞的生长抑制效应明显强于唑来膦酸或MTX单独用药，这说明唑来膦酸能增强骨肉瘤细胞对MTX的化疗敏感性。为两种药物在临床上的应用提供了一定的理论依据。二膦酸盐类药物毒副作用小、无骨髓抑制、患者对其耐受性好故可较大剂量长期使用。在用MTX化疗时，添加唑来膦酸可以减少MTX的用量，增加疗效，有利于减轻化疗的不良反应。不过试验中作者也发现协同作用的大小和药物作用的时间、剂量有关。最佳联合用药的浓度、时间尚需进一步体内试验或临床试验验证。【参考