丹参延缓高同型半胱氨酸血症兔动脉粥样硬化形成的形态学研究

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1、丹参延缓高同型半胱氨酸血症兔动脉粥样硬化形成的形态学研究：周玲生，张海燕，周路坦【摘要】目的探讨丹参对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)兔动脉粥样硬化的干预作用。方法随机将40只家兔分成对照组(A)，蛋氨酸组(B)，高脂组(C)，丹参+蛋氨酸组(D)，分别于实验0，4，8周检测各组血浆同型半胱氨酸(Hcy)改变和病理学观察腹主动脉血管病理变化。结果B组第4，8周时血浆Hcy含量显著高于同时段A组(P<0.01);D组与B组比较，4周水平接近，8周末时低于同时段B组(P<0.01)。说明随用药时间延长,丹参干预组血浆Hcy含量上升幅度明显小于同时段蛋氨酸组。病

2、理学变化：B组、C组腹主动脉大体观察有明显粥样斑块形成;D组与正常组比较无明显差异。结论HHcy可致动脉粥样硬化的形成，丹参具有延缓或干预其动脉粥样硬化形成的作用。【关键词】动脉粥样硬化;丹参;高同型半胱氨酸血症　本研究分别采用高L-蛋氨酸建立兔Hhcy血症模型和高脂饮食方法建立兔高脂血症模型，通过与对照组、丹参+蛋氨酸组形成动脉粥样斑块的比较，及各组血浆同型半胱氨酸(Hcy)含量的比较，观察Hhcy致AS形成机制;检验丹参对Hhcy引起AS病理过程的干预效果，为Hhcy的防治、延缓或防治AS的形成，降低心、脑血管病的发生风险拓宽新思路，提供新靶点。　　1材料与仪器

3、　　1.1动物筛选健康雄性中国家兔40只(由武汉万千嘉禾实验动物养殖有限公司提供)，月龄3～5个月，体质量在1.5～2.0kg。　　1.2药品与试剂丹参中草药购于河南省南阳市医药公司，由南阳医学高等专科学校药理教研室按比组方，经煎制、过滤、浓缩为1g/ml(以生药汁)丹参口服液，高压灭菌，0℃冰箱保存备用。高L-蛋氨酸购自张家港市华昌药业有限公司。Hcy试剂盒由北京九强生物技术有限公司提供。　　1.3仪器美国GELg-9彩色多普勒超声诊断仪(TOSHIBA生产)，TBA-120FR生化分析仪，TU-1810紫外分光光度计，Bio-rad680酶标仪，(2/2)VI普

4、通Ⅰ类B型脱水机，孝感宏业TS-12L，日本原装进口(1/2)JVCTK-C921EC显微镜摄像机，日本原装进口OLYMPUSCX31显微镜，德国原装进口mICROMGMBHHm200切片机，CS-摊片机。　　2方法　　2.1动物分组实验动物以标准饲料适应性喂养1周后，随机分为4组，即：对照组(A)，蛋氨酸组(B)，高脂组(C)，丹参+蛋氨酸组(D)。每组10只。A组：喂标准饲料+等量的生理盐水灌胃;(B)组：喂蛋氨酸饲料，即标饲+蛋氨酸0.1g/(kg·d)用蒸馏水稀释灌胃;(C)组：喂高脂饲料(标饲+2%胆固醇+5%猪油)+等量的生理盐水灌胃;D组：所喂饲料同蛋

5、氨酸组,同时给予丹参口服液3.3g/(kg·d)灌胃。各组动物饲料按每天100g/只计算，分笼喂养，自由饮水，隔周称重，调整给药量，连续喂饲8周。上述各组兔均限食量,每兔每日100g。　　2.2Hcy含量检测分别于喂药的第0，4，8周末时，自兔耳缘静脉采血2ml，离心后用循环酶法检测血浆Hcy含量。　　2.3病理观察实验第8周末,颈动脉放血处死动物。立即取降主动脉至腹主动脉分叉处血管，10%甲醛固定、取材、脱水、血管横断包埋、石蜡切片、HE染色、光镜观察。　　2.4统计学分析各组数据用±s表示,并用SPSS13.0统计学软件进行处理，组间进行F检验判定，P<0

6、.05有统计学意义。　　3结果　　3.1各组家兔血浆Hcy含量的变化0周时各组血浆Hcy含量分布符合正态分布，其95%的可信区间为16.67～22.44μmol/L(即正常参考值)，超过此值上限确定为兔高同型半胱氨酸血症(Hhcy)。B组在第4周、8周末时Hcy均显著高于同期对照组(P<0.01);C组两时段Hcy含量均与A组接近无显著差异;D组与B组比较,4周Hcy水平接近，8周末时低于同时段B组(P<0.01)。说明随用药时间延长,丹参干预组血浆Hcy含量上升幅度明显小于同时段蛋氨酸组。实验期间各组家兔一般情况良好，B组有2只，C组1只死亡。结果见表

7、1表1各组家兔血浆Hcy含量比较　　3.2各组家兔腹主动脉血管病理变化大体观察：沿腹主动脉管壁剪开，A组、D组动脉内膜无明显斑块形成，B组、C组可见内膜不规则隆起斑块。　　4讨论　　4.1HHcy兔模型制备成功本研究给家兔喂食高蛋氨酸饲料，实验第0，4，8周时测定血清Hcy水平，4，8周时蛋氨酸组血清Hcy含量均显著高于同时段对照组，表明兔Hhcy模型制备成功。腹主动脉组织学观查，血管内膜明显增厚，中层结构紊乱，有细颗粒状粥糜样物质及斑块形成，均为动脉硬化的改变，进一步证实，Hhcy可引起动脉血管发生病理改变，是致动脉粥样硬化的独立危险因素。图1A组血管(HE染