中药复方君子汤联合环孢霉素a逆转白血病细胞株 k562-vcr耐药性的实验研究

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1、中药复方君子汤联合环孢霉素A逆转白血病细胞株K562/VCR耐药性的实验研究作者：廖斌,葛仁英,陈霞,皇甫真萍,齐彦,宋永平,魏旭东【摘要】本研究观察中药复方君子汤（FFJZ）联合环孢霉素A(cyclosporineA,CsA)逆转白血病耐药细胞系K562/VCR细胞耐药性的效果，以便寻找有效的联合逆转剂。采用MTT法、流式细胞术研究FFJZ联合CsA逆转白血病耐药细胞系K562/VCR耐药性的作用。结果表明：FFJZ联合CsA在体外对K562/VCR细胞的耐药性有明显的逆转作用（p＜0.01)，能提高K562/VCR细胞对阿霉素（ADM）的敏感性，且在药物有效浓度范围内对细胞本身无毒

2、性作用。FFJZ联合CsA对K562/VCR细胞的Pgp表达的阳性率无明显影响。结论：复方君子汤联合环孢霉素A可能成为治疗白血病多药耐药的安全有效的耐药逆转药物。【关键词】白血病SynergisticReversalEffectofChineseMedicinepoundFFJZbinediaK562/VCRCellLineAbstractThestudyedicinepoundFFJZinbinationultidrugresistance(MDR)ofhumanleukemiaK562/VCRcellline，astosearcheffectivebinationofMDRmod

3、ulators.MTT(methylthazoltetrazolinum)assayinethecytotoicandreversaleffectsonK562/VCRcellline,FCM(floetry)ycin(ADM)concentrationandtheexpressionofPgpincells.Therasultsshoycin.TheyhadnotthetoxiceffectontheK562/VCRcellsineffectivedoseandnosignificantinfluenceonPgppositiverateoftheK562/VCRcells.

4、ItisconcludedthattheFFJZinbinationaybeeasafeandeffectivemultidrugresistancereversingagentiachemotherapy.Keyia；multidrugresistance；ChinesemedicinepoundFFJZ；cyclosporineA；K562/VCRcell；PglycoprotEin多药耐药(multidrugresistance,MDR)，即在化疗初期效果好，但经过几个疗程治疗后，肿瘤细胞不但对所用药物有耐药性，而且对其他结构和作用机理不同的多种来源的药物也产生交叉耐药性，导

5、致联合化疗方案失败。中医中药用于肿瘤治疗是我国特有的传统治疗手段。目前的研究显示，中医药对肿瘤的防治与康复均具有重要作用，可协同化疗药物发挥增效减毒的作用。因此，从中药复方中寻找高效低毒的MDR逆转剂成为肿瘤研究中的一个热门课题，而且是可行途径。本实验观察复方君子汤(FFJZ)与环孢霉素A(CsA)联合应用对白血病耐药细胞耐药性的逆转作用，并初步分析其作用机理，为今后研究提供依据。材料和方法细胞中药复方君子汤联合环孢霉素A逆转白血病细胞株K562/VCR耐药性的实验研究人红白血病耐药细胞株K562/VCR和敏感细胞株K562均由河南省肿瘤医院中心实验室惠赠。药物和试剂FFJZ（主要成分

6、：党参、白术、茯苓、黄芪、川芎、浙贝、绞股蓝、补骨脂、甘草）由河南省肿瘤医院中药制剂室提供；注射用盐酸长春新碱为广州明兴制药厂的产品；MTT为Serva公司产品；胎牛血清（BSA）,250毫升/瓶，为Sigma产品；台盼蓝为Chroma进口产品，由上海化学试剂分装厂分装）；PRMI1640培养粉为美国Gibco公司产品；二甲亚砜（DMSO），500毫升/瓶，为北京化工厂生产；Pgp单克隆抗体为美国Coulter公司产品；环孢霉素A(CsA)为瑞士Sandoz公司产品；注射用盐酸阿霉素(ADM），10毫克/支，为浙江海正药业股份有限公司产品。主要仪器OLYMPUS倒置相差显微镜：IX7

7、1型，日本生产；水套式CO2培养箱：CJ1100型，长沙长棉应用技术研究所生产；手提式蒸汽灭菌器：YX280B型，上海医疗器械厂生产；干燥箱：101A1型，编号0057，上海实验仪器总厂生产；酶联免疫检测仪：DG3022A型，中国人民解放军第四军医大学国营华东电子管厂生产；流式细胞仪：CoulterEPICS型，BeckmanCoulter公司产品。细胞培养K562细胞培养用RPMI1640培养液(含10%小牛血清、链霉素及青霉素各100U