中药复方君子汤诱导急性白血病细胞凋亡的实验的研究与临床疗效观察

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1、中药复方君子汤诱导急性白血病细胞凋亡的实验研究及临床疗效观察作者姓名：张逸摘要背景：白血病是一类造血干细胞克隆性恶性疾病，是最常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率逐渐上升，造血过程中细胞分化及凋亡受阻是白血病的重要发病机制。多种类型的白血病细胞可在体内或体外经各种化合物的作用发生终术分化和凋亡，中药毒副作用小，随着人类对肿瘤认识的不断提高，中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究也成为热点。目的：观察中药复方君子汤(FFJZ)诱导白血病K562细胞凋亡的作用特点及其对急性白血病患者的疗效，以了解FFJZ对化疗的增效减毒作用，从而为FFJZ用于AL的治疗提供实验及临床依据，并初步探讨出中西医结合治

2、疗急性自血病的方法。方法：l、体外实验：(1)细胞形态学观察：将不同浓度FFJZ与K562细胞共同培养，于24小时、48小时、72小时，在倒置显微镜下观察细胞生长状况；(2)采用台盼蓝拒染法观察细胞活性；(3)采用MTT法观察K562细胞株增殖情况；(4)流式细胞仪(FCM)测定细胞内AnnexinV—FITC／PI荧光强度，以检测细胞凋亡数。2、临床研究：对40例急性白血病患者，按随机原则分组治疗，其中治疗组20例，应用FFJZ配合化疗治疗；对照组20例，应用化疗治疗，观察两组的疗效。结果：1、体外实验：(1)K562细胞经FFJZ作用48小时后，浓度在lmg／ml及以下组出现

3、细胞形态呈梭状、棒状，伴有胞浆丝状突起形成伪足，2Illg／mlFFJZ组细胞与对照组无明显差别，4mg／m1及6mg／mlFFJZ组，细胞出现皱缩、破碎；8mg／mlFFJZ及lOmg／mlFFJZ组细胞经培养24小时后，即出现细胞明显变小，且均匀分散，以后时间里均呈现此种状况。(2)经0．Olmg／ml-lmg／m1FFJZ作用后的K562细胞，不同时间计数活细胞数均于对照组无明显差异(P>0．05)，2mg／mlFFJZ作用于K562细胞，各时期活细胞计数均较对照组略低(P

4、，与As：03(3uM)组细胞活力无明显差别(P>O．05)。细胞培养24小时后，6lng／mlFFJZ组及8mg／mlFFJZ组细胞增殖受抑，活细胞计数下降，lOmg／mlFFJZ组细胞最为明显，几乎无活细胞。(3)2mg／m1FFJZ组与空白对照组无显著差别(P>O．05)，其余FFJz组对K562细胞的抑制率随药物浓度的加大而增加(各浓度组与未加药对照组相比有显著性差异(P<0．01)。6mg／mlFFJZ组及8mg／mlFFJZ组与其它组相比有统计学意义(P<0．05)，4mg／mlFFJZ组与As2030uM)组无明显差异(P>0．05)。FFJZ对K562细胞的半数抑

5、制浓度(IC50)约为5．6mg／ml。(4)FFJZ质量浓度2mg／m1时，诱导凋亡作用不明显，与对照组比较无差异(P>0．05)，当其质量浓度达到4mg／ml时，早期凋亡明显增多，与未加药组相比差异有统计学意义(尸<0．01)，至8mg／m1组时，细胞早期凋亡率下降，与空白组相比仍有显著差异，(P0．05)。2、临床研究：(1)临床观察的结果治疗组总有效率(

6、75％)明显高于对照组(45％)，差异有统计学意义(P<0．05)；(2)治疗组达完全缓解8例，对照组达完全缓解6例，随访1年，两组达完全缓解时间及持续时间无统计学意义(P>0．05)；(3)两组发生不良反应例数无统计学意义(P>0．05)。?’结论：FFJZ可以抑制K562白血病细胞的生长和增殖，在体外一定浓度范围内可诱导K562细胞凋亡，低浓度FFJZ可诱导K562细胞发生类似分化的细胞形态学改变。FFJZ联合化疗能增强抗白血病药物的疗效，值得进一步临床研究。关键词：自血病／中西医结合疗法急性病K562细胞／药物作用细胞凋亡／～药物作用复方君子汤+‘’’'‘TheStudyo

7、ftheApoptoticAcuteLeukemiaCellsInducedbyChineseMedicineCompoundFFJZ一●Abstract．Background：Leukemiaisc。qusedbythemaglignantcloneofthehemopoieticstemcells．ItiSoneofthemostcommoo湖ceranditsmorbidityisincreasedinrecentyear．Thestaggingofthedifferent