长春七中蛇床子素的提取方法和含量测定研究

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1、长春七中蛇床子素的提取方法和含量测定研究作者：张宇洁，贺浪冲，苗延青，靖会【关键词】长春七；,,蛇床子素；,,反相高效液相色谱法　　摘要：目的建立草药长春七中蛇床子素的提取方法，对其中蛇床子素的含量进行测定并与蛇床子中蛇床子素的含量进行比较。方法以蛇床子素为指标，用反相高效液相色谱法，色谱柱：KromasilC18（150mm×4.6mm,5μm），流动相：甲醇水（75∶25）,流速：1ml・min1，二级管阵列检测器选定波长：302nm。系统考察不同溶剂、不同提取方式对蛇床子素提取率的影响，并用正交试验法进一步优选提取条件。用最终确定的条件对蛇床子素

2、的含量进行测定。结果用6倍量80%乙醇回流提取3次（1h/次）的提取方法可以获得较高的蛇床子素提取率。结论溶剂种类和提取方式对长春七中蛇床子素的提取效率有较大影响。　　关键词：长春七；蛇床子素；反相高效液相色谱法　　StudiesontheExtractiveMethodsandQuantitativeAnalysisofOstholfromLibanotisbuethorimensis　　Abstract：ObjectiveToestablishanoptimalextractivemethodofostholanddetermineitscontentinLib

3、anotisbuethorimensis,monnieri(L.)Cuss.MethodsRPHPLCmethodinationoftheostholontheKromasilC18column(150mm×4.6mm,5μm)obilephaseofmethanoll・min1.TheUVdetectionodelsonextractionratiooftheostholaticallyinvestigated,andalsotheorthogonaltestumextractingconditions,thendetermineostholbyth

4、eoptimumextractingconditions.ResultsTheextractionrateusedtherefluentmethodesand1heachtimeesasmuchasthatofothermethods.ConclusionThesolventkindsandextractionmodelshavegreatinfluenceupontheextractingefficiencyofosthol.　　Keyensis；Osthol；RPHPLC　　长春七为伞形科岩风属植物长春七Libanotisbuethorimensis的干燥根，是

5、秦巴山区特有的草药，性温，味辛、甘。《现代中药大辞典》［1］记载其有祛风散寒、活血止痛的功效。现代药理研究表明，长春七中的中性油和酚酸部分具有镇痛、镇静作用，中性油尚有一定解热和抗关节炎作用。经细胞膜受体色谱模型［2］筛选，发现长春七中对血管内皮细胞有作用的活性成分是蛇床子素，为此本实验就长春七中蛇床子素的提取方法和含量测定方法进行了研究。长春七化学成分的研究［3~5］和蛇床子药材中蛇床子素含量的测定已有　　2.6回收率实验准确称取已测知含量的长春七样品粉末6份，各0.1g，分别加入对照品溶液适量，按上述方法处理，依法测定。测得蛇床子素平均回收率为99.49%，RS

6、D为1.93%。　　2.7提取溶剂选择取长春七生药，粉碎成细粉，称取0.2g，精密称定。分别加入一定体积的11种不同溶剂，超声提取30min。静置过夜，滤过，定容至10ml，离心（10000r・min1）后过滤，准确吸取滤液10μl，进样分析蛇床子素含量（见表1）。结果表明：氯仿和80%乙醇作溶剂的提取率较高，考虑实际应用的可行性，选择80%乙醇作为提取溶剂。　　表1不同提取溶剂的实验结果（略）　　2.8提取方式选择取长春七细粉0.2g，精密称定，用80%乙醇作为溶剂，分别用不同的提取方式进行提取，滤过，定容至10ml。离心（10000r・

7、;min1）后过滤，准确吸取滤液10μl，进样分析蛇床子素的含量（见表2）。结果表明，超声和80%乙醇加热回流2h，蛇床子素的提取率较高，因此在含量测定中可选择超声法，但在工艺研究中选择回流方式。　　表2不同提取方法的实验结果（略）　　2.9正交实验表1的结果表明80%的乙醇回流提取率较高，因此，取长春七细粉20g，采用3因素3水平正交实验法对提取溶剂倍量、回流时间、回流次数进行试验研究（表3）。将提取液定容至500ml，用HPLC法测定溶液中蛇床子素含量，计算其提取率（见表4）。　　表3因素水平（略）　　表4正交实验表（L9（34））（略）　　2.10方差分析