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时间:2018-07-10
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1、HPLC法测定妇科洗中蛇床子素含量【摘要】目的:建立妇科洗中蛇床子素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,用ShimpackVP-ODSC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水(62∶38)为流动相,流速:1.0mL/min,检测波长为323nm。结果:蛇床子素在1.35~32.4μg/mL呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.52%,RSD=1.36%。结论:所建方法准确可靠,操作简便,稳定性好,可用于妇科洗的质量控制。【关键词】HPLC法;妇科洗;蛇床子素ContentdeterminationofOstholeinFukexibyHPLCWuZhaox
2、uanChenHuihong(DepartmentofPharmacy,LiuzhouHospitalofTraditionalChineseMedicine,Liuzhou545001,China)【Abstract】ObjectiveToestablishancontentmethoddeterminationofOstholeinFukexi.MethodsTheHPLCwithaShimpackVP-ODSC18column(150mm×4.6mm,5μm)wasusedandthemobilephaseconsistedofmethanol-water(62∶38)attheflow
3、rateof1.0mL/min.TheUV-detectionwavelengthwassetat323nm.ResultsThelinearrange8ofOstholewas1.35~32.4μg/mL(r=0.9999).Therecoverywas98.52%,andtheRSD=1.36%.ConclusionThemethodissimpleaccurateandstable,anditcanbeusedforthequalitycontrolofFukexi.【Keywords】HPLC;Fukexi;Osthole妇科洗是我院自制制剂,由黄柏、苦参、蛇床子、鱼腥草等中药组成,具
4、有清热燥湿、泻火解毒、杀虫止痒等功效。原定标准中只对中药成分定性鉴别,为有效控制本品质量,对方中主药蛇床子的有效成分蛇床子素进行含量测定研究。1仪器与试药LC-20A高效液相色谱仪,SPD-20A紫外检测器,LC-20AT输液泵,LCsolution工作站(日本岛津公司);AL204电子天平(瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司);双频数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);UV-1601紫外可见分光光度计(日本岛津公司)。蛇床子素对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110822-200305,供含量测定用);乙腈为色谱纯;水为纯化水;其他试剂均为分析纯。妇科洗(规格:250ml/瓶,柳州市中医
5、院制剂室制备)。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱:ShimpackVP-ODS8C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水(62∶38),流速:1.0mL/min,柱温:30℃,检测波长为323nm,理论塔板数按蛇床子素峰计算应不低于3000。2.2测定波长选择取蛇床子素对照品适量,加乙醇使溶解,用紫外分光光度计于200-400nm范围内扫描,结果表明,蛇床子素对照品在323nm波长处有最大吸收峰,因此选择波长323nm为测定波长。2.3对照品溶液的制备取蛇床子素对照品适量,精密称定,加乙醇制成每1ml含0.054mg的溶液,即得。2.4线性关系考察精密吸取对照品溶液0.25
6、、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00mL于10mL量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,分别精密吸取20μL进样,按“2.1”项下的色谱条件,以浓度C(μg/mL)为横坐标,峰面积A为纵坐标进行线性回归分析,得回归方程:A=84974C+8431,r=0.9999,结果表明蛇床子素在1.35~32.4μg/mL范围内线性关系良好。2.5供试品溶液的制备精密量取本品50ml,水浴蒸干,加95%乙醇20ml,溶解,超声10min,定容至25ml,即得。2.6阴性对照溶液的制备8取不含蛇床子的处方药材,按妇科洗的制备方法制备阴性样品,精密量50ml,照供试品溶液的制备方法,制备阴性对照溶液。
7、2.7阴性干扰试验按“2.1”项下的色谱条件,分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各20μL进样测定,结果供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上有一相同保留时间的色谱峰,而阴性对照溶液无干扰,见图1。ABC图1高效液相色谱图A.蛇床子素对照品;B.样品;C.阴性对照;1.蛇床子素Fig1HPLCchromatogramsA.Ostholereferencesubstance;B.sampl
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