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时间:2018-07-07
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1、长春七中蛇床子素的提取方法和含量测定研究张宇洁,贺浪冲,苗延青,靖会【关键词】长春七;,,蛇床子素;,,反相高效液相色谱法 摘要:目的建立草药长春七中蛇床子素的提取方法,对其中蛇床子素的含量进行测定并与蛇床子中蛇床子素的含量进行比较。方法以蛇床子素为指标,用反相高效液相色谱法,色谱柱:KromasilC18(150mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇水(75∶25),流速:1ml・min1,二级管阵列检测器选定波长:302nm。系统考察不同溶剂、不同提取方式对蛇床子素提取率的影响,并用正交试验法进一步优选提取条件。用最终确定
2、的条件对蛇床子素的含量进行测定。结果用6倍量80%乙醇回流提取3次(1h/次)的提取方法可以获得较高的蛇床子素提取率。结论溶剂种类和提取方式对长春七中蛇床子素的提取效率有较大影响。 关键词:长春七;蛇床子素;反相高效液相色谱法 StudiesontheExtractiveMethodsandQuantitativeAnalysisofOstholfromLibanotisbuethorimensis Abstract:ObjectiveToestablishanoptimalextractivemethodofosthola
3、nddetermineitscontentinLibanotisbuethorimensis,monnieri(L.)Cuss.MethodsRPHPLCmethodinationoftheostholontheKromasilC18column(150mm×4.6mm,5μm)obilephaseofmethanoll・min1.TheUVdetectionodelsonextractionratiooftheostholaticallyinvestigated,andalsotheorthogonaltestumextract
4、ingconditions,thendetermineostholbytheoptimumextractingconditions.ResultsTheextractionrateusedtherefluentmethodesand1heachtimeesasmuchasthatofothermethods.ConclusionThesolventkindsandextractionmodelshavegreatinfluenceupontheextractingefficiencyofosthol. Keyensis;Osth
5、ol;RPHPLC 长春七为伞形科岩风属植物长春七Libanotisbuethorimensis的干燥根,是秦巴山区特有的草药,性温,味辛、甘。《现代中药大辞典》〔1〕记载其有祛风散寒、活血止痛的功效。现代药理研究表明,长春七中的中性油和酚酸部分具有镇痛、镇静作用,中性油尚有一定解热和抗关节炎作用。经细胞膜受体色谱模型〔2〕筛选,发现长春七中对血管内皮细胞有作用的活性成分是蛇床子素,为此本实验就长春七中蛇床子素的提取方法和含量测定方法进行了研究。长春七化学成分的研究〔3~5〕和蛇床子药材中蛇床子素含量的测定已有文献报道,但未见对
6、长春七活性筛选和其中蛇床子素定量检测的报道。本实验中用不同溶剂、不同提取方法及正交实验法,较为系统地研究了长春七中蛇床子素的提取方法,用高效液相色谱法对长春七药材中蛇床子素的含量进行了测定并与蛇床子药材进行了比较。 1仪器与试药 高效液相系统包括:LC10ATvp色谱泵,SPD10Avp紫外检测器(日本岛津公司)和7725i型进样器(美国Rheodyne公司);ANASTAR色谱工作站(中国奥泰科技有限公司)。蛇床子素对照品(中国药品生物制品检定所);长春七药材,蛇床子药材(西安市药材市场),经西安交通大学药学院生药教研室鉴定
7、为正品。色谱纯甲醇(美国Fisher公司),双蒸去离子水(实验室自制)。 2方法与结果 2.1对照品溶液制备取蛇床子素对照品约50mg,精密称定,置于50ml量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇匀。置于冰箱(4℃)内备用。 2.2色谱条件色谱柱:KromasilC18(150mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇水(75∶25),流速:1ml・min1,检测波长:302nm。在此条件下测得蛇床子素对照品及长春七,蛇床子总提物的色谱图如图1~3所示。 1.蛇床子素11蛇床子素紫外光谱图 图1蛇床子素标准品(略) 1.蛇床
8、子素12蛇床子素紫外光谱图 图2长春七总提取物(略) 1.蛇床子素13蛇床子素紫外光谱图 图3蛇床子总提取物(略) 2.3标准曲线分别配制不同浓度的蛇床子素对照品溶液,在上述色谱条件下进行测定,进样量为10μl。以蛇床子素进样量(X)对峰面
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