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《消化性溃疡幽门螺杆菌感染与toll样受体4基因多态性的相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、消化性溃疡幽门螺杆菌感染与Toll样受体4基因多态性的相关性研究【关键词】消化性溃疡幽门螺杆菌感染Toll样受体 HP感染是引起人类慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌等疾病的病因之一，但研究发现在HP感染者中仅有极少数会发生上述疾病。HP致病机制与细菌数量、毒力以及环境因素、宿主易感性、胃肠黏膜内环境等有关。人类TLR4通过识别病原相关分子构型(PAMPs),激活先天性免疫应答机制，同时还诱导共刺激分子CD80的表达，为获得性免疫的启动提供活化信号，因此在免疫系统中有着十分重要的作用［1］。TLR4作为细菌脂多糖(LPS)的
2、受体,将LPS传导通路的信号迅速传至核内,通过激活核因子-kB(NF-kB),刺激NO分泌,消灭病原；还可促进炎性细胞因子表达与释放,激活特异性免疫反应［2］。本研究通过探讨TLR4基因突变与HP感染相关性消化性溃疡的关系,旨在为阐明HP感染相关性消化性溃疡的遗传易感性和先天性免疫机制提供依据。 1临床资料 1.1一般资料 于2006年7月至2007年6月间，在温州医学院附属第二医院消化内科，依据悉尼分类标准［3］收集消化性溃疡患者120例(胃溃疡51例、十二指肠球部溃疡69例)。其中男72例,女48例；平均年龄
3、52.2岁。正常体检者204例作为对照组,男104例,女100例；平均年龄39.2岁。 1.2方法 (1)取外周静脉血5ml，EDTA抗凝，蛋白酶K/酚/氯仿法提取基因组DNA。 (2)PCR扩增目的基因，根据 3讨论 TLR是人类在进化过程中所保留的参与先天性抗感染的受体蛋白家族，具有高度保守性。TLR不仅通过识别病原微生物的PAMP,激活先天性免疫反应,还诱导共刺激分子CD80的表达，为获得性免疫的启动提供必要的活化信号，因此在免疫系统中有着十分重要的作用。TLR超家族已发现有10个家族成员，其中TLR4
4、、TLR2与宿主的免疫功能有着密切联系，可识别不同的病原分子。TLR4主要作为革兰阴性菌LPS的特异性受体，在LPS诱导的信号传导中起着重要作用，TLR2则主要作为革兰阳性菌的肽聚糖、酵母菌的甘露聚糖及某些特定的LPS的受体。TLR4接触不同的抗原分子后，通过协同分子CD14、LPS结合蛋白、MD2的共同作用，经由MyD88、TIRAP/MAL等信号传导途径，将LPS传导通路的信号迅速传至核内，激活NF-кB通道，刺激NO分泌，消灭病原菌；此外，激活相关细胞因子的表达，释放炎症细胞因子，激活特异性免疫反应，因而在机体的
5、先天性免疫中起到十分重要的作用。Arbour等用单链构象多态性分析法(PCR-SSCP)和基因测序的方法发现了TLR4基因的非同义的单核甘酸多态性Asp299Gly和Thr399Ile，除体外转染研究证实Asp299Gly多态性与LPS的反应减低有关外，Asp299Gly和Thr399Ile等位基因杂合子和纯合子个体与野生型基因型的个体相比，吸入性LPS的气道反应明显减低。小鼠C3H/HeJ和C57BL/10ScCr株对LPS高度抵抗，缺乏先天性免疫的生物作用，易受感染,是由于小鼠TLR4基因突变导致对LPS无反应，或
6、LPS信号传导异常所致。野生型TLR4的表达增强可使LPS的信号增强。研究发现TLR4基因的突变可改变肠黏膜先天性免疫细胞和肠上皮TLR4分子结构，使机体的免疫系统失去正常处理肠腔内的大量细菌和LPS等病原分子的能力，进而使肠黏膜在长期的刺激下产生感染、炎症、过敏、易激乃至癌变。 流行病学调查结果显示：人群中HP感染率与其社会经济地位关系密切，发达国家成人HP感染率<40%,而我国人群感染率为20%～80%，明显高于经济发达国家。本研究中,正常浙江汉族人群HP感染率是60.1%,与以上的研究结果一致。同时已有大
7、量研究资料显示:HP感染率高的地区和国家人群的胃炎和消化性溃疡的发病率也较高，如经济落后国家同发达的欧美国家比较,HP感染相关性胃炎和消化性溃疡的发病率也高。通过对浙江汉族人群HP感染的检测,发现消化性溃疡患者组HP感染率显著高于对照组(P＝0.000,OR=12.512,95%CI:5.255～29.792)。本研究采用PCR限制性片段长度多态性分析的方法,对120例消化性溃疡患者及204例正常对照者TLR4基因sp299Gly基因型及等位基因分布进行检测,发现所有样本均为野生型基因型,提示在中国浙江汉族人群中罕见T
8、LR4基因Asp299Gly突变基因型。 树突状细胞(DC)是重要的抗原提呈细胞，在机体免疫应答过程中起着至关重要的作用。目前研究发现胃黏膜上皮DC能穿过胃上皮细胞间的紧密连接,到达胃黏液层与HP接触［7］,HP能够特异性地定植于胃黏膜的黏液层下的上皮细胞表面；另发现在活体内胃上皮细胞可以表达TLR［8］。国外Bauditz等［
