同种异体腱移植重建膝关节交叉韧带的研究

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1、同种异体腱移植重建膝关节交叉韧带的研究作者：赵永生，滕学仁，胡光亮，周伦【摘要】目的从实验角度观察程序冷冻液氮保存和－80℃深低温保存方法处理同种异体髌腱后重建膝关节交叉韧带的愈合过程并比较其差异。方法将兔的1/2骨髌腱骨复合体经-80℃深低温保存和程序冷冻液氮保存2周后观察冻存变化差异并行同种异体移植重建前交叉韧带，分别于术后3周和8周观察细胞毒反应、细胞活性、最大载荷和形态学变化等指标进行比较并与自体移植组对照。结果a)经程序冷冻液氮保存方法处理后，髌腱的最大载荷无明显下降，细胞活性得到了较好的保存，组织学观察冷冻损伤较－80℃深低温保存方法轻微；b)程序冷冻液氮保存处理的移植物在术后

2、未表现明显的排斥反应，且免疫反应随时间的推移而下降；c)移植后3周，各组移植物的最大载荷无显著差异(P＞0.05)，移植后8周，程序冷冻液氮保存组移植物的最大载荷(55.87±1.86)N优于－80℃深低温保存组(52.14±2.79)，而和自体移植组相近(57.70±2.76)N；d)从组织学观察看，－80℃深低温保存组和程序冷冻液氮保存组移植后的愈合过程均和自体移植组相似，而程序冷冻液氮保存组的愈合过程和组织学行为更接近于自体移植组。结论经深低温保存的兔异体髌腱重建膝关节交叉韧带后愈合过程和自体韧带移植重建过程相似。程序冷冻液氮保存法优于传统的－80℃深低温保存法。【关键词】同种异体腱；交

3、叉韧带；重建Abstract：ObjectiveTostudythedifferenceofhealingprocessofreconstructingthekneecruciateligamentsfreezingand－80℃deepfrozen.MethodsReconstructtheACLofthekneefreezing，andthecellspoisonresponse，cellsactivity，themaximumloadandmorphologicchangesofthegraftsfreezing，themaximumloadoftheallograftshasnoev

4、identdecreaseandthecellactivityofallograftsfreezingoreslightthan－80℃deepfrozen，2.Noevidentrejectreactioncanbeseenduringthehealingprocessafterdeepfrozenandtherejectreactiondeclinedasthetimepassby.3.Threeaximumload(P＞0.05)，Eightaximumloadofthe　groupthatfreezing(76.60±4.67)Nilarilarfreezinggroupisbett

5、er.Conclusion1.Thehealingprocessofthetilarfreezingmethodisbetterthanthetraditional－80℃deepfrozenmethodinthisexperiment.Keyent；reconstruction膝关节交叉韧带损伤公认的手术方法是韧带重建，但自体材料移植存在着取腱并发症和组织来源有限等问题，而人工韧带技术发展不成熟，生物工程韧带也只是处于研究阶段，在这种情况下，同种异体腱移植成为重建膝关节交叉韧带的另一种选择。目前深低温冷冻是保存同种异体腱最可行的方法［1］，最常用的是－80℃深低温冰箱保存，但其保存时间有限

6、，且不能理想地保存细胞活性，而普通液氮保存方法又不能做到严格的控制性降温。因此，在实验中我们对移植物的冻存方法作了一定的改进，提出了程序冷冻液氮保存的方法处理异体肌腱，做到了液氮保存前严格控制性降温，最大限度地减少了超深低温冷冻对肌腱的损伤。1材料与方法1.1实验动物与分组新西兰大白兔82只，体重2000±100g，随机分为A、B、C三组。A组12只大白兔取双侧膝关节1/2骨髌腱骨复合体共48条，将所取BPTB再随机平分为三组，即新鲜未冷冻组(A1组)、－80℃深低温保存2周组(A2组)和程序冷冻液氮保存2周组(A3组)，以比较冷冻对兔髌腱的影响；B组10只供异体腱；C组60只大白兔再随机

7、平分为三组，即自体移植组(C1组)、－80℃深低温保存异体移植组(C2组)和程序冷冻液氮保存异体移植组(C3组)，以比较不同保存方法对移植物愈合过程的影响。1.2髌腱复合体的取材与保存A、B两组动物取双侧膝关节髌骨髌腱胫骨结节复合体平分，以1/2骨髌腱骨复合体做为测试样本或移植物。程序冷冻液氮保存方法：将冻存管放入程序冷冻仪(CBS2100，USA)中，按设定好的冷冻程序先以1℃/min的