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《榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的体外研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的体外研究作者:黄秀榕,祁明信,康可人【关键词】榄香烯;,姜黄素;,晶状体;,上皮细胞；,凋亡 摘要:目的探讨榄香烯(Ele)和姜黄素(Cur)对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的诱导效应及其机制。方法将培养的牛LEC分别与160μg/mLEle和20μg/mLCur在CO2培养箱中共同孵育8,16,24,48,72h,通过透射电子显微镜观察LEC超微结构;采用流式细胞术(FCM)测定LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(ΔΨm)。结果LEC分别与Ele和Cur共同孵育后,电子显微镜下可观察到细胞核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等,均呈现典型的细胞凋
2、亡的形态学改变。FCM分析可见典型的凋亡亚G1峰,提示细胞核内DNA含量下降,并随药物作用时间的延长而加强。FCM检测发现细胞质出现线粒体ΔΨm下降,且在药物作用早期已发生变化。结论Ele和Cur能显著诱导LEC凋亡;细胞核内DNA含量下降、细胞质内线粒体ΔΨm降低,分别是Ele和Cur诱导LEC凋亡的细胞核和细胞质途径。线粒体ΔΨm下降是Ele和Cur诱导LEC凋亡的早期事件。 关键词:榄香烯;姜黄素;晶状体;上皮细胞；凋亡 ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectandthemechanismofelemene(Ele)andCurcumin(C
3、ur)onapoptosisoflensepithelialcell(LEC)invitro.MethodsThebovineLECculturedLEleand20μg/mLCurissionelectronmicroscopy.ThechangesofDNAcontentandmitochondrialtransmembranepotential(ΔΨm)inLECetry.ResultsThetypicalmorphologicalchangesofLECapoptosisinEleandCurgroupissionelectronmicroscope,suchaschromatinco
4、ndensationandaggregationatthenuclearperiphery,andnuclearfragmentationasedependently.TheΔΨmofLECinEleandCurgroupdecreasedfromearlystage.ConclusionEleandCurcanremarkablyinduceapoptosisofLECinvitro.ThedecreaseofDNAcontentinLECnucleusandthecollapseofmitochondrialtransmembranepotential(ΔΨm)incytoplasmare
5、thenucleuandcytoplasmeventsofapoptosismechanisms.ThedecreasedofΔΨminducedbyEleandCuristheearlyeventofLECapoptosis. KEY期),抑制肿瘤细胞增殖并导致细胞凋亡[23]。从姜科植物的根茎姜黄中提取的姜黄素(curcumin,Cur)具有抗氧化、抗增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长等作用,且毒副作用小,故日益受到关注[47]。笔者采用电子显微镜及流式细胞仪(floetry,FCM),通过观察LEC的凋亡形态改变、检测LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(mitochondrialtr
6、ansmembranepotential,ΔΨm)的改变,探讨Ele和Cur诱导LEC凋亡及其细胞学和分子生物学机制,为从天然药物中寻求防治后发性白内障的药物提供科学的实验依据。 1材料和方法 1.1材料 1.1.1试剂 榄香烯乳(大连金港制药有限公司,批号0110113),姜黄素(美国Sigma公司),DMEM培养液(dulbecco’smodifiedeagle’smedium,美国Gibco公司),胎牛血清(FBS,杭州四季青生物工程材料有限公司),胰蛋白酶(Trypsin,美国Amresco公司),乙二胺四乙酸(EDTA,美国Augus公司),碘化丙啶(PI,美国Sigma公司
7、),核糖核酸酶A(RNaseA,北京华美生物工程公司),细胞凋亡线粒体流式检测试剂盒(MitoCapturemitochondrialapoptosisdetectionkit,美国BioVision公司)。 1.1.2仪器 二氧化碳培养箱(3112A,美国Forma公司),透射电子显微镜(Hu12A,日本日立公司),倒置相差显微镜(日本Olympus公司),低温冰箱(日本Sanyo公司),流
