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《榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的体外研究.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的体外研究作者:黄秀榕,祁明信,康可人【关键词】榄香烯;,姜黄素;,晶状体;,上皮细胞;,凋亡 摘要:目的探讨榄香烯(Ele)和姜黄素(Cur)对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的诱导效应及其机制。方法将培养的牛LEC分别与160μg/mLEle和20μg/mLCur在CO2培养箱中共同孵育8,16,24,48,72h,通过透射电子显微镜观察LEC超微结构;采用流式细胞术(FCM)测定LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(ΔΨm)。结果LEC分别与Ele
2、和Cur共同孵育后,电子显微镜下可观察到细胞核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等,均呈现典型的细胞凋亡的形态学改变。FCM分析可见典型的凋亡亚G1峰,提示细胞核内DNA含量下降,并随药物作用时间的延长而加强。FCM检测发现细胞质出现线粒体ΔΨm下降,且在药物作用早期已发生变化。结论Ele和Cur能显著诱导LEC凋亡;细胞核内DNA含量下降、细胞质内线粒体ΔΨm降低,分别是Ele和Cur诱导LEC凋亡的细胞核和细胞质途径。线粒体ΔΨm下降是Ele和Cur诱导LEC凋亡的早期事件。 关键词:榄香烯;姜
3、黄素;晶状体;上皮细胞;凋亡 ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectandthemechanismofelemene(Ele)andCurcumin(Cur)onapoptosisoflensepithelialcell(LEC)invitro.MethodsThebovineLECculturedwith160μg/mLEleand20μg/mLCurwereobservedbyusingtransmissionelectronmicroscopy.T
4、hechangesofDNAcontentandmitochondrialtransmembranepotential(ΔΨm)inLECweredetectedbyflowcytometry.ResultsThetypicalmorphologicalchangesofLECapoptosisinEleandCurgroupwereobservedundertransmissionelectronmicroscope,suchaschromatincondensationandaggregati
5、onatthenuclearperiphery,andnuclearfragmentationaswell.TheDNAcontentofLECinEleandCurgroupdecreasedtimedependently.TheΔΨmofLECinEleandCurgroupdecreasedfromearlystage.ConclusionEleandCurcanremarkablyinduceapoptosisofLECinvitro.ThedecreaseofDNAcontentinLE
6、Cnucleusandthecollapseofmitochondrialtransmembranepotential(ΔΨm)incytoplasmarethenucleuandcytoplasmeventsofapoptosismechanisms.ThedecreasedofΔΨminducedbyEleandCuristheearlyeventofLECapoptosis. KEYWORDS:elemene;curcumin;lens;epithelialcell;apoptosis6
7、 白内障囊外摘除联合人工晶状体植入术是目前白内障手术的主要方法,其近期疗效已十分肯定。但术后发生的后囊混浊,又称后发性白内障,导致远期视力下降是其主要的并发症之一。白内障术后残留的晶状体上皮细胞(lensepithelialcell,LEC)在晶状体囊膜上的增生、移行、产生胶原,是发生后囊混浊的主要原因。寻求高效低毒的防治后发障的药物具有重大意义[1]。有研究表明,从中药莪术中提取的挥发油榄香烯(elemene,Ele)可阻滞细胞从DNA合成期(S期)进入合成后期/分裂期(G2/M期),抑制肿瘤细
8、胞增殖并导致细胞凋亡[23]。从姜科植物的根茎姜黄中提取的姜黄素(curcumin,Cur)具有抗氧化、抗增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长等作用,且毒副作用小,故日益受到关注[47]。笔者采用电子显微镜及流式细胞仪(flowcytometry,FCM),通过观察LEC的凋亡形态改变、检测LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(mitochondrialtransmembranepotential,ΔΨm)的改变,探讨Ele和Cur诱导LEC凋亡及其细胞学和分子生物学机制,为从天然药