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《慢性前脑缺血致痴呆大鼠脑血流量及行为学对比研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、慢性前脑缺血致痴呆大鼠脑血流量及行为学对比研究作者:孙莉金涛丁艳华王茜【摘要】目的研究脑血流量在慢性前脑缺血致血管性痴呆(VD)发病机制中的作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎方法制备慢性前脑缺血动物模型;应用激光多普勒血流仪检测各组大鼠术后不同时间点(术后24h、1iainducingvasculardementia(VD).MethodsChronicforebrainischemiamodeladebypermanentocclusionofbilateralcarotidarteries.Thecognitivefunctionoftheratsa
2、tedbyMorrisazetestandrCBFinprefrontalcortex,parietalcortex,hippocampusandsubcortexetryonanydifferenttimepointafteroperation(24h,7,14d,1,2,3,4mon).ResultsrCBFinprefrontalcortex,parietalcortex,hippocampusandsubcortexobviouslydecreased,especiallyon24hpostoperation,andalgroupon4monpo
3、stoperationobviously.rCBFshoonofthechroniccerebralhypoperfusionandlasteduntil4mon.ConclusionsThereductionofrCBFmightbeinducedbypermanentocclusionofbilateralcarotidarteries,pairmentofthecognitionfunction.【Keyia;Vasculardementia(VD);Morrisaze;Cerebralbloodflog/kg)腹腔注射麻醉,保证手术期间有自主呼吸
4、。仰卧固定,颈部去毛、强力碘消毒后沿颈正中切开,分离双侧颈总动脉,并套以“0”号线。分别结扎双侧颈总动脉的远近端,并从中间剪断,以确保阻断动脉血流。术中大鼠肛温保持在36.5℃~37.5℃,手术后动物送至有通风和空调设备的动物房饲养。对照组(假手术组)除不结扎不剪断双侧颈总动脉外,其余过程与实验组相同。1.2行为学检测各组选择10只大鼠采用Morris水迷宫法进行大鼠记忆功能的测定。Morris水迷宫(Morrisaze,M)由中国医学科学院生产,为一不锈钢的圆形水池,直径130cm,高50cm。池壁标明4个入水点,由此将水池等分为4个象限,任选其中1个
5、象限,正中放置1个直径11cm、高29cm的平台。实验室温度保持在24℃~25℃,Morris水迷宫中加入奶粉1kg,用热水冲开,再用水加至高过安全平台1cm,水温控制在(26±1)℃。奶水中不能明显见到安全平台。水池四周存在丰富的空间参考线索(门、窗、灯、实验者等),且保持不变以供大鼠定位平台。迷宫上方安有摄像机,并和录像机以及显示器连接,自动录入大鼠游泳轨迹进行分析。测试程序为定位航行试验(placenavigation):历时4d,每天上、下午各2次,将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中,记录其在3min内寻找到并爬上平台的时间即逃避潜伏期(es
6、capelatency)。如果大鼠在3min未找到平台,则由实验者用手牵引其至平台上,让大鼠停留10s,再放回笼中,潜伏期记为最高分180s。以后,分别在术后1、2、3、4月重新进行水迷宫实验,大鼠每次在3min内寻找到并爬上平台的时间为大鼠的记忆成绩,每日2次,连续4d,计算平均成绩。1.3CBF测定各组选择6只大鼠,麻醉后固定于立体定位仪,按《大鼠脑立体定位图谱》,剪开颅顶皮肤,用牙科钻钻透颅骨。将光纤探头PF303用微型支架固定,额叶CBF测定选择前囟前3mm、中线旁2mm点;顶叶选择前囟后4mm、中线旁2mm点;海马选择前囟后4mm、中线旁2mm
7、点,进针3.5mm;皮质下区选择前囟后1.8mm、中线旁3.5mm点,进针6.5mm。应用瑞典PerimedAB公司生产的PeriFluxSystem5000型激光多普勒血流仪(LDP),激光二极管光源为2m。频率范围0~4kHz,光纤探头为PF303不锈钢探头,直径1.0mm,纤维分离0.25mm,术野和探头覆盖1%琼脂液,血流仪增益为1,最大上限频率为12kHz,连续测定每只大鼠额叶、顶叶、海马和皮质下区的CBF变化10min,记录LDP输出信号,经PERISOFT程序处理,计算平均值。1.4统计学分析本实验各组资料结果均以x±s表示,实验组和对照组
8、间比较采用t检验,实验组组间两两比较采用单因素方差分析进行统计学处理。2结果2.