桔实皮中橙皮苷的提取测定及对自由基清除作用的研究

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1、桔实皮中橙皮苷的提取测定及对自由基清除作用的研究作者：陈建秋，胡志军，王南溪，沈卫阳【摘要】　　目的优化分光光度法测定橙皮苷含量的实验方法和桔实中双氢黄酮类橙皮苷的提取工艺。方法分析方法：采用L9(34)正交实验,考察溶剂类型、显色时间、温度和显色剂用量等影响因素；提取工艺：采用L9(34)正交实验,考察乙醇浓度、溶剂用量、提取时间和提取温度等影响因素；参照Fenton反应原理研究不同桔实中黄酮的清除·OH中作用。结果分光光度法测定橙皮苷含量的最佳实验条件：橙皮苷与5%Al(NO3)3溶液（m:V），在20℃反应20min，最大吸收波长为400

2、nm；橙皮苷提取的最佳工艺条件：70%乙醇为提取溶剂，采用料液比1∶20（m∶V）,在50℃下中速搅拌提取3h。桔实中黄酮提取液对Fenton体系产生的·OH有一定的清除能力。结论优选得到的提取工艺提取不同桔实中的橙皮苷，发现橘皮中橙皮苷含量最高。【关键词】橙皮苷；提取工艺；正交实验；含量测定；自由基清除　　Abstract：ObjectiveTostudythedeterminationmethodofhesperidincontentbyspectrophotometerandextractiontechnologyofhesperidin

3、frompeelsofcitrus.MethodsAnalysistechnology:Thetypeofsolvent,temperature,quantityofindicatorandthetimeofreactioneandtemperatureofextractionpeelsofcitrusonhydroxylradicalumtechnicalconditionsfordeterminingthecontentofhesperidinbyspectrophotometermersed:V）at20℃for20minandthema

4、ximumabsorbance；theoptimumtechnicalconditionsofextractinghesperidinedium-speed,themassratioofpeels:V）.Inaddition,totalflavanonefrompeelsofcitrushadeffectsonscavengingofhydroxylradicals.ConclusionThecontentofhesperidininpeelsisthehighestbyimprovedextractiontechnology.　　Keyina

5、tion；Scavengingofhydroxylradicals　　橙皮苷（Hesperidin）即柑桔素-7-O-新橙皮糖苷,分子式C28H34O15，属双氢黄酮类化合物,主要存在于柑、橘、甜橙和柠檬等的果皮中。纯品为白色细树枝状针形晶体，熔点258～262℃，2％吡啶溶液中比旋光度为-76°，相对分子量为610.26。橙皮苷是构成Vp的主要成分，有保护毛细血管，降低毛细血管的脆性，防止微血管破裂出血的作用，作为医药工业用作治疗高血压病和心肌梗塞的药物被广泛使用［1～3］。橙皮苷不溶于乙醚、苯、丙酮及氯仿，难溶于水，微溶于乙醇、甲醇，可溶于

6、吡啶、甘油、稀碱溶液,常用的提取方法有溶剂提取法、碱提酸沉法、超声波提取法、微波提取法和酶解法［4］，其中溶剂提取法和碱提酸沉法操作简单而经济，提取率也较高。橙皮苷结构式中存在3-羟基、C-4位羰基能与三氯化铝或硝酸铝生成黄色络合物，可用分光光度法检测［4］。本研究分别对橙皮苷络合物的显色条件和橙皮苷溶剂浸提工艺进行了优化，并在此基础上，测定了不同桔实中橙皮苷的含量，为工业生产企业挑选原材料提供依据。同时，对不同桔实提取液进行了羟自由基清除作用的研究。　　1仪器与材料　　1.1仪器BS124型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；HD型恒温水浴

7、锅（上海分析仪器厂）；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；UV-9100紫外/可见分光光度计（北京瑞利分析仪器有限公司）；研磨机（上海灿坤实业有限公司）。　　1.2试剂盐酸(37%，南京化学试剂有限公司)；乙醇(97.0%，南京化学试剂有限公司)；七水合硫酸亚铁（99.0%，广东·汕头市西陇化工厂）；水杨酸（99.5%，南京化学试剂有限公司）；氢氧化钠(99.0%，南京化学试剂有限公司)；硝酸铝（96.0%，南京化学试剂有限公司）；30%过氧化氢（南京化学试剂有限公司）。以上试剂均为分析纯，实验用水为蒸馏水。　　分别将试剂配

8、成如下使用液：氢氧化钠溶液（0.1mol/L）；稀盐酸（体积分数7%）；Al(NO3)3溶液（质量体积分数5%）；乙醇：(体积分数100%，70%，4