抗炎止痛口服液对佐剂诱导性关节炎治疗作用的研究

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1、抗炎止痛口服液对佐剂诱导性关节炎治疗作用的研究作者：马玉琛，段斐，孟明，郭晓燕，寇素茹，马幼敏【摘要】　　目的研究抗炎止痛口服液对AIA的治疗效果。方法采用弗氏完全佐剂造模，对6组采用不同药物和剂量的大鼠进行治疗观察。结果抗炎止痛口服液中小剂量组在体重、脾指数、病理检测方面与正常组无差别，同模型组有显著性差别。结论抗炎止痛口服液对AIA有良好的治疗效果。【关键词】抗炎止痛口服液；诱导性关节炎；胸腺指数；脾指数；关节肿　　近年来，应用中医中药治疗类风湿关节炎的研究越来越多，以经验方为依据，制成便于服用的剂型，也是临床上经常采用的

2、方法。通过广泛的临床观察发现，中西医结合疗法不仅可以提高临床疗效，而且能够减轻西药的毒副反应，因而也是应用较普遍的方法。本实验应用大鼠佐剂诱导性关节炎（adjuvantinducearthritis,AIA）模型，研究中药抗炎止痛口服液对AIA的治疗效果。　　1器材与方法　　1.1动物健康SD大鼠，雄性，体重150～180g。（购自河北医科大学实验动物中心）动物级别：SPF；动物许可证号608139。购入本实验室的动物室适应性饲料2d，然后进行造模实验。　　1.2药物与试剂　　抗炎止痛口服液，由252医院药剂科提供，批号200

3、40922，常温保存。雷公藤多苷片，100mg/片，湖南省株州市制药厂生产，研成粉末溶于水，4℃冰箱保存。卡介苗冻干粉，卫生部北京生物制品研究所，批号200605。液体石蜡，中国上海宝山县化工厂生产，批号050817。羊毛脂，北京市昌平石鹰化工厂生产，批号061127。　　1.3仪器与设备　　自制的大鼠足容积测量仪［1］。电子秤及电子天平。石蜡切片机，日本莱卡。　　1.4模型制作［2］　　将液体石蜡、羊毛脂按2∶1的比例混合均匀，高压灭菌后4°C保存，使用时加入卡介苗（10mg/ml）配制成弗氏完全佐剂（CFA），充分研磨混匀

4、乳化后，取0.1ml注射于大鼠左后足垫皮内致敏，正常对照组注射0.1ml生理盐水。在造模后17，39d分别测量大鼠的体重及足跖肿胀度，39d断头处死大鼠，收集血清，取材脾脏、胸腺、致炎侧踝关节、进行指标检测。　　1.5分组及给药方法　　SD大鼠60只。随机分为正常对照组、AIA模型组、雷公藤阳性药组及抗炎止痛口服液大、中、小剂量组，每组10只。造模后18d开始每天上午8：00～10：00灌胃给药，正常组和AA模型组给予生理盐水，每天每只大鼠2ml；雷公藤组每天20mg/kg；中药抗炎止痛口服液组大剂量每天60g/kg，中剂量每

5、天30g/kg（相当于人临床用药量的10倍），小剂量每天15g/kg；连续给药21d。　　1.6观察项目及检测方法　　1.6.1AA大鼠的体重、脏器指数、足跖肿胀度的测定在致炎后17d和39d分别测量AA大鼠的体重和致炎侧足跖肿胀度（容积排水法）［3］，并用正常组对照，致炎39d取脾脏和胸腺称量，计算脏器指数（计算公式：脾指数=平均脾重量/平均体重）。　　1.6.2足爪容积的测定　　致炎前测量每只大鼠的后足体积，致炎后2，5，10，17，39d测量大鼠致炎侧后足爪肿胀度（容积排水法）。　　1.6.3组织病理学检测于致炎第39天

6、断头处死大鼠，立即分离后肢致炎侧病变关节，10%甲醛固定，EDTA脱钙，乙醇逐级脱水，常规包埋，切片，苏木素-伊红（HE）染色，并进行组织学评价和拍照，同时以相同±s方法取正常大鼠相同关节部位作为对照。　　1.6.4统计学处理　　数据均用±s表示，采用SPSS进行统计学分析，组间比较行单因素方差分析(one-.　　2结果　　2.1各组大鼠体重变化比较　　结果见表1。AIA模型组大鼠从致炎后第2周起体重增长缓慢，第17天和第39天体重明显低于同期饲养的正常组大鼠（P<0.05），与雷公藤阳性药组接近，而抗炎止痛口服液治疗中

7、、小剂量组大鼠体重与正常组比较，差异无显著性（P>0.05），大剂量组大鼠体重减轻。表1各组大鼠体重变化比较（略）　　2.2各组大鼠胸腺、脾脏指数变化比较　　见表2。AIA模型组大鼠39d的胸腺、脾脏指数明显高于正常组（P<0.05），雷公藤治疗组,抗炎止痛口服液大剂量组大鼠的胸腺、脾脏指数明显低于AIA组大鼠(P<0.05)。抗炎止痛口服液中剂量治疗组大鼠的胸腺指数和脾脏指数，与正常组比较，差异无显著性（P>0.05）。表2各组大鼠致炎39d胸腺及脾脏指数变化比较（略）　　2.3各组大鼠致炎侧踝关节肿

8、胀度比较　　结果见表3。AIA大鼠致炎后15h，致炎侧足肿胀达高峰，表现为早期的炎症反应，持续2～3d逐渐减轻，7～8d后再度肿胀，继发病变于致炎后10天左右出现，表现为对侧和前足肿胀，且进行性加重，大鼠行动不便，体重下降，表现类似人类RA［4］。各实验组大鼠于致敏后2，5，