抗炎止痛口服液对佐剂诱导性关节炎治疗作用的研究

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1、抗炎止痛口服液对佐剂诱导性关节炎治疗作用的研究作者：马玉琛，段斐，孟明，郭晓燕，寇素茹，马幼敏【摘要】　　目的研究抗炎止痛口服液对AIA的治疗效果。方法采用弗氏完全佐剂造模，对6组采用不同药物和剂量的大鼠进行治疗观察。结果抗炎止痛口服液中小剂量组在体重、脾指数、病理检测方面与正常组无差别，同模型组有显著性差别。结论抗炎止痛口服液对AIA有良好的治疗效果。【关键词】抗炎止痛口服液；诱导性关节炎；胸腺指数；脾指数；关节肿近年来，应用中医中药治疗类风湿关节炎的研究越来越多，以经验方为依据，制成便于服用的剂型，也是临床上经常采用的方法。通过广泛的临床观察发现，中西医结合疗法不仅可以提高临

2、床疗效，而且能够减轻西药的毒副反应，因而也是应用较普遍的方法。本实验应用大鼠佐剂诱导性关节炎模型，研究中药抗炎止痛口服液对AIA的治疗效果。　1器材与方法动物健康SD大鼠，雄性，体重150～180g。动物级别：SPF；动物许可证号608139。购入本实验室的动物室适应性饲料d，然后进行造模实验。药物与试剂抗炎止痛口服液，由25医院药剂科提供，批号XX0922，常温保存。雷公藤多苷片，100mg/片，湖南省株州市制药厂生产，研成粉末溶于水，4℃冰箱保存。卡介苗冻干粉，卫生部北京生物制品研究所，批号XX5。液体石蜡，中国上海宝山县化工厂生产，批号050817。羊毛脂，北京市昌平石鹰化

3、工厂生产，批号061127。仪器与设备自制的大鼠足容积测量仪［1］。电子秤及电子天平。石蜡切片机，日本莱卡。模型制作［2］将液体石蜡、羊毛脂按2∶1的比例混合均匀，高压灭菌后4°C保存，使用时加入卡介苗配制成弗氏完全佐剂，充分研磨混匀乳化后，取ml注射于大鼠左后足垫皮内致敏，正常对照组注射ml生理盐水。在造模后17，3d分别测量大鼠的体重及足跖肿胀度，3d断头处死大鼠，收集血清，取材脾脏、胸腺、致炎侧踝关节、进行指标检测。分组及给药方法　　SD大鼠60只。随机分为正常对照组、AIA模型组、雷公藤阳性药组及抗炎止痛口服液大、中、小剂量组，每组10只。造模后1d开始每天上午8：00～

4、10：00灌胃给药，正常组和AA模型组给予生理盐水，每天每只大鼠ml；雷公藤组每天20mg/kg；中药抗炎止痛口服液组大剂量每天60g/kg，中剂量每天30g/kg，小剂量每天1g/kg；连续给药21d。观察项目及检测方法AA大鼠的体重、脏器指数、足跖肿胀度的测定在致炎后1d和3d分别测量AA大鼠的体重和致炎侧足跖肿胀度［3］，并用正常组对照，致炎3d取脾脏和胸腺称量，计算脏器指数。足爪容积的测定致炎前测量每只大鼠的后足体积，致炎后2，5，10，17，3d测量大鼠致炎侧后足爪肿胀度。组织病理学检测于致炎第39天断头处死大鼠，立即分离后肢致炎侧病变关节，10%甲醛固定，EDTA脱钙

5、，乙醇逐级脱水，常规包埋，切片，苏木素-伊红染色，并进行组织学评价和拍照，同时以相同±s方法取正常大鼠相同关节部位作为对照。统计学处理　　数据均用±s表示，采用SPSS进行统计学分析，组间比较行单因素方差分析(one-wayANOVA)，用最小显著差法(leastsignificantdifference,LSD)作两两比较，以P结果.1各组大鼠体重变化比较结果见表1。AIA模型组大鼠从致炎后第2周起体重增长缓慢，第17天和第39天体重明显低于同期饲养的正常组大鼠，与雷公藤阳性药组接近，而抗炎止痛口服液治疗中、小剂量组大鼠体重与正常组比较，差异无显著性，大剂量组大鼠体重减轻。表1

6、各组大鼠体重变化比较.各组大鼠胸腺、脾脏指数变化比较见表2。AIA模型组大鼠3d的胸腺、脾脏指数明显高于正常组，雷公藤治疗组,抗炎止痛口服液大剂量组大鼠的胸腺、脾脏指数明显低于AIA组大鼠(P.各组大鼠致炎侧踝关节肿胀度比较结果见表3。AIA大鼠致炎后15h，致炎侧足肿胀达高峰，表现为早期的炎症反应，持续2～d逐渐减轻，7～d后再度肿胀，继发病变于致炎后10天左右出现，表现为对侧和前足肿胀，且进行性加重，大鼠行动不便，体重下降，表现类似人类RA［4］。各实验组大鼠于致敏后2，5，10，17，28，3d，用容积排水法测量致炎侧踝关节肿胀度。AIA模型组足肿胀度明显高于正常组。雷公藤

7、治疗组及抗炎止痛口服液大、中剂量治疗组大鼠足肿胀度明显低于AIA模型组。表3致炎前后各实验组大鼠关节肿胀度比较.4各组大鼠致炎侧踝关节肿胀度比较镜检结果显示，在正常大鼠的关节滑膜组织，可见1～2层滑膜细胞，滑膜下有成熟滑膜组织。细胞排列整齐，关节面光滑无渗出物。致炎3d，AIA大鼠关节滑膜增生，呈绒毛状排列紊乱，可向关节腔内突出，部分滑膜剥脱缺失，并有大量炎性细胞浸润，软组织明显水肿。抗炎止痛口服液治疗组和雷公藤治疗组大鼠关节滑膜增生，只有少许剥脱，组织水肿较轻，并见少量炎细胞浸