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时间:2018-05-02
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1、分析D3形态学低评分胚胎囊胚形成的影响因素 随着序贯培养系统的不断完善,形态学低评分胚胎的利用价值日益受到关注。已有报道形态学低评分胚胎经体外继续培养仍有一部分能发育成囊胚,且移植这些由取卵后第3天(D3)形态学低评分胚胎培养而来的囊胚最终获得妊娠,并且可以利用这类形态学低评分胚胎建立人类胚胎干细胞(humanembryonicstemcell)系用于研究。已有很多文献报道了胚胎形态与低评分胚胎囊胚形成的关系,但对形态学低评分胚胎囊胚形成的相关临床因素却很少涉及,本研究通过对影响低评分胚胎囊胚形成的相关临床因素及胚胎因素进行分析,为如何
2、挑选低评分胚胎继续培养以及提高囊胚形成率及质量提供理论支持和数据参考。 1对象与方法 1.1研究对象 收集2012年4月2012年12月在本生殖中心行常规体外受精/胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSIET)治疗且满足以下纳入标准的所有患者:①第1个IVF/ICSI-ET治疗周期。②采用黄体中期降调的长方案。③新鲜周期移植2个或3个优质胚胎后还有剩余的低评分胚胎行囊胚培养,移植优质胚胎后若还有剩余的优质胚胎则进行玻璃化快速冷冻保存。经患者知情同意后将低评分胚胎移入囊胚培养液中继续培养观察,记录囊胚发育情况,有囊胚形成者根据囊胚
3、质量选择冻存或丢弃。422个周期共有1745个低评分胚胎进行了继续囊胚培养。 1.2实验方法 1.2.1胚胎培养及评估 按Peter卵裂期胚胎评分系统评估D3胚胎质量[4]。Ⅰ级:卵裂球大小一致,胞质均匀,细胞碎片<10%;Ⅱ级:卵裂球大小一致,胞质均匀,10%≤细胞碎片≤20%;Ⅲ级:卵裂球大小不一致,胞质不均匀,细胞碎片<10%;Ⅳ级:卵裂球大小不一致、胞质均匀,20%<细胞碎片≤40%,或卵裂球大小不一致,胞质不均匀,10%≤细胞碎片≤20%;Ⅴ级:细胞碎片>40%;Ⅵ级:
4、全碎片。D3有7~8个细胞数的Ⅰ、Ⅱ级胚胎为优质胚胎,其余D3胚胎为形态学低评分胚胎。 1.2.2囊胚培养及评分 将低评分胚胎移至预先平衡好的G2培养液微滴中培养至5~7d,观察胚胎发育情况,根据Gardner囊胚评分系统[5]对囊胚进行评分,将D5和D6评分≥3BB囊胚定为优质囊胚。 1.2.3评价指标 主要观察指标:观察囊胚形成率及优质囊胚形成率。 1.3统计学方法 采用SPSS16.0统计软件包进行统计学分析,结果以百分率表示,率的比较采用χ2检验,显著性检验水准为α=0.05;组内两两比较按照
5、χ2分割法,则分3组中的两两比较的检验水平为0.0125。 2结果 2.1囊胚形成情况 本研究共收集422个取卵周期1745个低评分胚胎进行囊胚培养,共形成囊胚1046个,囊胚形成率为59.9%,其中优质囊胚为763个,优质囊胚形成率为43.7%。 2.2年龄、基础窦卵泡数及基础卵泡刺激素(bFSH)与囊胚形成的关系 年龄≤35岁组的优质囊胚形成率高于年龄>35岁组,差异有统计学意义(P<0.01),而2组的囊胚形成率差异无统计学意义(P>0.05)。患者基础窦卵泡数、bFSH各自组间的囊胚形成率
6、及优质囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.05)。 2.3促性腺激素(Gn)总剂量、人绒毛膜促性腺激素(hCG)日雌二醇(E2)水平、获卵数与囊胚形成的关系 随着Gn总剂量的增大,囊胚形成率及优质囊胚形成率逐渐降低,但组间囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.05)。根据hCG日E2水平将患者分3组,3组间的囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.05)。获卵11~20个组的囊胚形成率及优质囊胚形成率最高,获卵≤10个组的囊胚形成率及优质囊胚形成率最低,但各组间囊胚形成率及优质囊
7、胚形成率差异均无统计学意义(P>0.05)。 2.4D3卵裂细胞数、胚胎碎片与囊胚形成的关系 D3卵裂细胞球数为4~6个组的囊胚形成率及优质囊胚形成均最低,与卵裂细胞数为7~9个、10~14个组相比差异均有统计学意义(P<0.0125),卵裂细胞数为7~9个与10~14个组相比,其囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.0125)。D3胚胎碎片≤10%组的囊胚形成率及优质囊胚形成率高于碎片为20%~25%组,≤10%组优质囊胚形成率高于10%<碎片<20%组,差异有统计学意义(P
8、<0.0125)。其他各组间的囊胚形成率及优质囊胚形成率差异均无统计学意义(P>0.0125)。 3讨论 囊胚的形成受多种因素的影响,单独依据形态学评分来衡量囊胚的形成情况有一
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