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《厄贝沙坦对stz诱导的糖尿病大鼠肾脏ctgf、p27kip1表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、厄贝沙坦对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏CTGF、p27kip1表达的影响：黄海泉，刘必成，刘殿阁，罗冬冬，马坤岭[摘要]目的：观察厄贝沙坦（Irb）对大鼠糖尿病模型肾脏结缔组织生长因子（CTGF）、p27kip1表达的影响。方法：将SD大鼠分为健康对照组(Ｃ组)、糖尿病肾病组(DN组)和糖尿病肾病Irb治疗组(DNI组),DN组和DNI组大鼠制成糖尿病模型,DNI组予以50mg・kg-1伊贝沙坦灌胃。各组大鼠再分为4个亚组，分别于成模后1、2、4、8周时处死，观察各组大鼠的血糖、体重、24h尿白蛋白、内生肌酐清除率(Ccr)、肾重、
2、肾脏肥大指数、肾小球面积(AG)和体积(VG)、肾小管面积(AT)、肾小球基底膜（GBM）厚度、肾小管基底膜（TBM）厚度的改变，通过免疫组化观察肾CTGF和p27kip1的表达。结果：DN组和DNI组大鼠血糖较Ｃ组明显升高且维持在一个较高水平(P<0.01)。Ｃ组体重增长迅速，DN组和DNI组大鼠体重增长缓慢(P<0.01)。DN组大鼠的24h尿白蛋白、Ccr、肾重、肾脏肥大指数、AT和VG在糖尿病早期即呈时间依赖性增加(P<0.01或P<0.05)。免疫组化半定量分析显示，各期DN组大鼠肾小球和肾小管的CTGF、p2
3、7kip1表达均高于Ｃ组(P<0.01或P<0.05)。8周时DN组大鼠GBM和TBM均较Ｃ组明显增厚(P<0.01)，而Irb可显著抑制上述参数的增加。CTGF与p27kip1的表达、24h尿白蛋白、AT、AG、VG呈显著正相关关系(P<0.05)。结论：早期应用Irb可抑制糖尿病大鼠早期肾脏肥大和CTGF与p27kip1的表达，此为早期使用该药预防DN肾脏肥大的发生提供了新的理论依据。[关键词]厄贝沙坦;糖尿病;肾脏肥大;结缔组织生长因子;p27kip1；大鼠结缔组织生长因子(connectivetissuegro等
4、[1]首次在培养的人脐静脉内皮细胞中发现了这种细胞因子,进一步研究发现,CTGF广泛分布于人体各种组织、器官和体液中，具有促进细胞有丝分裂和胞外基质合成、趋化,促进细胞凋亡,调节血管生成等作用，是一个重要的致纤维化因子[2]。我们近期体外细胞培养实验亦证实，CTGF可能介导了AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞肥大。周期素激酶抑制剂p27增多，在高糖培养系膜细胞肥大及糖尿病(DM)肾小球细胞肥大中起重要作用[34]。临床及实验室的结果表明厄贝沙坦(irbsartan，Irb)对糖尿病肾病(DN)有保护作用，可减轻肾脏肥大程度和蛋白尿，保护肾功能[57]
5、，但其确切机制尚不清楚。本研究拟在CTGF和p27水平探讨Irb治疗ＤＮ的作用机制，为防治DN提供一定的理论指导。1材料与方法1.1模型建立和分组将体重为（180±20）g的清洁级雄性SpragueDaa公司)(溶于pH4.0、0.1mol・L-1枸橼酸枸橼酸钠缓冲液)50mg・kg-1建立DM模型，Ｃ组大鼠仅给予0.1mol・L-1枸橼酸枸橼酸钠缓冲液腹腔注射。72h后大鼠尾静脉采血测血糖,以随机血糖高于16.7mmol・Ｌ-1作为大鼠DM模型建立标准。模型建立后即给予DNI组大鼠Irb
6、(法国Sanofi公司提供)50mg・kg-1・d-1灌胃，C组和DN组大鼠给予等量蒸馏水灌胃。实验期间,血糖过高的大鼠皮下注射胰岛素。室温18～20℃,湿度69%,12h交替照明,大鼠自由饮水、进食。1.2观察指标和测定方法实验开始后每周称体重（B1200EX型)。1.3病理定量分析HE染色切片,用CMIAS彩色图像处理系统(深圳瑞医科技发展有限公司),在400倍视野下每个标本测50个肾小球的直径和面积(AG)，并计算肾小球体积(ＶG)=4πｒ3/3(π=3.14,ｒ为肾小球半径)[8]。六氨银染色切片,用CMIA
7、S彩色图像处理系统,在200倍视野下每个标本测200个肾小管面积(AT)。肾组织的免疫组化半定量分析方法为，每个标本在200倍图像的肾皮质区依次选40个视野,染色阳性部位的深浅及范围以平均吸光度表示，p27kip1染色阳性部位及范围以平均阳性细胞核数表示。1.4CTGF和p27kip1的表达肾组织切片经二甲苯脱蜡、分级酒精水化后行免疫组化SP法(试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司)染色。一抗为羊抗人的CTGFＣ末端肽抗体(1∶100,Ｒ＆Ｄ公司),兔抗人的p27kip1多克隆抗体(1∶100,NeoMarkers公司)。所形成的复合物与AEC反
8、应后呈红色阳性并经苏木素复染固定。每次染色时均同时以PBS缓冲液替代一抗作阴性对照。1.5统计学处理用SPSS统计软件,组间数据用ANOVA分析。2结
