成肌纤维细胞在哮喘气道重塑中的作用及地塞米松对其的影响

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1、成肌纤维细胞在哮喘气道重塑中的作用及地塞米松对其的影响:林洁,戴元荣,赵初环,徐永安,吴成云,颜孙舜【摘要】目的:探讨成肌纤维细胞(MF)在哮喘气道重塑中的作用并观察地塞米松对其的影响。方法:SD大鼠30只,随机分为哮喘组(A组)、生理盐水对照组(C组)和地塞米松治疗组(D组),每组10只。利用卵白蛋白(OVA)/Al(OH)3致敏与OVA雾化吸入激发建立大鼠哮喘模型。免疫组化测定肺组织中支气管上皮下成肌纤维细胞的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达含量,并使用图像分析技术进行积分光密度(IOD)定量分析测定。ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1和I

2、FN-γ的浓度。结果:①定量分析测定的IOD值显示A组支气管上皮下MF的α-SMA表达量较C组显著增加(P<0.01),D组表达量较A组减少(P<0.05)。②ELISA法测定结果:A组BALF中TGF-β1浓度较C组显著升高(P<0.01),D组较A组浓度降低(P<0.01),但仍高于C组(P<0.05)。A组BALF中IFN-γ浓度较C组显著降低(P<0.01),D组较A组浓度高(P<0.01),但仍低于C组(P<0.05)。结论:MF在气道重塑形成中起重要作用。地塞米松可能通过减少TGF-β1,增加IFN-γ的产生,抑制MF增殖和表达,起到抗哮喘气道重塑的作用。【关

3、键词】哮喘;气道重塑;成肌纤维细胞;糖皮质激素;大鼠Abstract:Objective:Toexploretheeffectofmyofibroblast(MF)onasthmaticairodelingandtheeffectofdexamethasoneonit.Methods:Intheexperiment,thirtySprague-Dalydividedintotheasthmagroup(groupA),thesodiumchloridecontrolgroup(groupC)andthedexamethasonegroup(groupD).Thereina

4、ndAl(OH)3beforerepeatedlyexposedtoaerosolizedovalbumin.Theα-smoothmuscleactin(α-SMA)expressionsofMFofbronchialsubepitheliuminlungtissuemunohistochemistry.Byimageanalysistechnique,theirintegralopticaldensity(IOD)easuredbyELISA.Results:①paredingroupAportantroleinthecourseofairodeling.Dexame

5、thasonemaydecreasetheconcentrationofTGF-β1andincreasetheconcentrationofIFN-γ,theninhibitproliferationandexpressionofMF.SoDexamethasonemaybeaneffectivedrugtoinhibitasthmaticairodeling.Keya;airodeling;myofibroblast;glucocorticoids;rat大量研究证明,支气管哮喘不仅存在着气道炎症,而且还发生气道结构的改变,即气道重塑(airodeling)。气道重塑

6、并非只发生在重症哮喘或哮喘病程的晚期,有证据表明在儿童哮喘的早期就存在气道重塑[1,2]。近几年来,有关哮喘气道重塑的研究在国内外已成为一个热点课题。但到目前为止,其发生机制仍未完全阐明,也缺乏有效的防治措施。本研究建立大鼠哮喘模型,探讨成肌纤维细胞(myofibroblast,MF)在哮喘气道重塑中的作用并观察地塞米松对其的影响。1材料和方法1.1实验动物SPF级健康雄性SD大鼠30只,体重150~200g,SCXK(浙)2005-0019。1.2主要试剂和设备卵白蛋白(OVA),购自美国Sigma公司;Al(OH)3,自行配制;免疫组化一抗:小鼠抗大鼠α-平滑肌肌动蛋

7、白(α-SMA)单克隆抗体,购自武汉博士德生物工程有限公司;免疫组化二抗:羊抗鼠即用型快速免疫组化MaxVisionTM试剂盒,购自福州迈新生物技术开发有限公司;大鼠TGF-β1试剂盒(ELISA)、大鼠IFN-γ试剂盒(ELISA)均为RapidBioLab.USA产品。自动洗板机(Biol-TekElX50),自动酶标仪(Bio-TEKELX808IU),OLYMPUS光学显微镜,图像采集系统(LOGENE-IYG免疫荧光图象处理2006版V1.2.10),图像分析软件Image-ProPlus5.1。1.3动物分组和模型

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