il10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究

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1、IL10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究:陈文博,谭长强,董伟达,李玉瑾,蔡文君,郭浪,李王伟【摘要】  目的:探索局部应用IL10基因与慢病毒重组载体对实验性自身免疫性感音神经性聋(ASNHL)的治疗作用。方法:采用纯化同种内耳抗原免疫豚鼠,造成ASNHL动物模型,再将重组载体分别经鼓阶、内淋巴囊和圆窗龛局部注射或渗透,观察听觉功能和内耳病理形态学变化,同时行免疫组织化学试验了解慢病毒转染和基因产物在内耳的分布。结果:治疗前后ABRⅢ波阈值的均值对比分析结果显示,各实验组局部基因治疗后均降低;治疗

2、后各实验组组间比较差异无统计学意义。慢病毒主要转染部位是血管纹、Corti器、蜗轴小血管周围及其内淋巴囊等处。基因产物表达部位与转染部位基本相同。结论:重组载体经不同途径均可转导入内耳,并在内耳表达基因产物,对ASNHL发挥有效的治疗作用。【关键词】自身免疫性感音神经性聋;基因治疗;慢病毒载体  [Abstract]Objective:Toevaluatetherapeuticeffectsoftransferringrebinantreplicationdefectivelentiviralvectorofinte

3、rleukinIL10genearkedintoinnerearforlocallytreatingexperimentalautoimmunesensorineuralhearingloss(ASNHL)inguineapig.Methods:Guineapigsmunizedalmodelsofautoimmunesensorineuralhearingloss.Theexperimentalgroupspanicscale,endolymphaticsacandroundembrane)fortherapyof

4、ASNHL.Beforeandaftergenetherapy(7days),auditorybrainstemresponse(ABR)thresholdsined,andtissueparaffinsectionsoftemporalboneadeandobservedbylightmicroscopyandelectronmicroscopy.Immunofluorescenceandenzymeimmunohistochemistrytestsadefordetectinglentiviraltransfect

5、ionandgeneproductexpression.Results:AftertreatmentthemeanthresholdofABRⅢentalA,B,Cgroupsloent;andcontrastingbetainlytransferredthepsalterialcord,cortiorgan,cochlearaxis,vesselsandendolymphaticsac,etc.Expressingpartsofgeneproductandthansferingpartse.Conclusion:Re

6、binantreplicationdefectivelentiviralvectorcantransferintoinnerearthroughdifferentapproachesandgenerategeneproduct,andshomunitysensorineuralhearingloss;genetherapy;lentiviralvector  1979年McCabe通过对部分感音神经性聋患者的临床观察[1],首先提出自身免疫性感音神经性聋这一概念(autoimmunesensorineuralheari

7、ngloss,ASNHL),之后许多相关专家和学者对该病进行了大量的实验与临床研究,现已证实,ASNHL是一种临床疾病实体。作为目前极少数可以获得有效治疗的感音神经性聋(SNHL)之一,对其进一步研究工作已成为耳科学领域的一个热点。  自1996年基因治疗应用于内耳,基因疗法被认为是未来治疗听力障碍最有希望的方法之一[2-3]。目前ASNHL治疗方面存在以下问题:激素和免疫抑制剂虽然有效,但需应用较长的时间,可造成不同程度的毒副作用;部分患者听力改善达到一定水平后,继续用药疗效甚微。基因治疗具有一次注射、长期有效的特点

8、,而且内耳解剖结构特点非常适合进行局部基因治疗。本项目组在前期实验研究中已采用腺病毒与白介素10(IL10)和Fasl基因构建重组载体,对ASNHL模型动物进行试验性治疗,证实具有显著的治疗效果[4]。本次实验采用IL10基因与慢病毒构建重组载体,经不同途径导入内耳,旨在进一步证实局部应用免疫调节基因对ASNHL的治疗效果以

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