IL10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究.doc

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1、IL10基因内耳局部治疗自身免疫性感音神经性聋的实验研究作者：陈文博，谭长强，董伟达，李玉瑾，蔡文君，郭浪，李王伟【摘要】目的：探索局部应用IL10基因与慢病毒重组载体对实验性自身免疫性感音神经性聋（ASNHL）的治疗作用。方法:采用纯化同种内耳抗原免疫豚鼠，造成ASNHL动物模型，再将重组载体分别经鼓阶、内淋巴囊和圆窗龛局部注射或渗透，观察听觉功能和内耳病理形态学变化，同时行免疫组织化学试验了解慢病毒转染和基因产物在内耳的分布。结果：治疗前后ABRIII波阈值的均值对比分析结果显示，各实验组局部基

2、因治疗后均降低；治疗后各实验组组间比较差异无统计学意义。慢病毒主要转染部位是血管纹、Corti器、蜗轴小血管周围及其内淋巴囊等处。基因产物表达部位与转染部位基本相同。结论：重组载体经不同途径均可转导入内耳，并在内耳表达基因产物，对ASNHL发挥有效的治疗作用。【关键词】自身免疫性感音神经性聋；基因治疗；慢病毒载体Abstract」Objective:Toevaluatetherapeuticeffectsoftransferringrecombinantreplicationdefectivelen

3、tiviralvectorofinterleukinIL10genewithGFPmarkedintoinnerearfor1ocallytreatingexperimentalautoimmunesensorineuralhearingloss(ASNHL)inguineapig・Methods:Guineapigswereimmunizedwith58kDpurifiedconspecificinnerearantigenandcausedanimalmodelsofautoimmunesens

4、orineuralhearingloss・Theexperimentalgroupswithrecombinanttherapeuticgenevectorsinjectingintoinnerearthroughthreeapproaches(tympanicscale,endolymphaticsacandroundwindowmembrane)fortherapyofASNHL.Beforeandaftergenetherapy(7days),auditorybrainstemresponse

5、(ABR)thresholdsweredetermined,andtissueparaffinsectionsoftemporalbonewasmadeandobservedby1ightmicroscopyandelectronmicroscopy.Immunofluorescenceandenzymeimmunohistochemistrytestswasmadefordetectinglentiviraltransfectionandgeneproductexpression.ResuIts:

6、AftertreatmentthemeanthresholdofABRIIIwaveinexperimentalA,B,Cgroupsloweredthanthatbeforetreatment:andcontrastingbetweenthesegroupstherewerenosignificantdifference・Lentrivirascarringpurposegenemainlytransferredthepsalterialcord,cortiorgan,cochlearaxis,v

7、esselsandendolymphaticsac,etc.Express!ngpartsofgeneproductandthansferingpartsweregeneral1ythesame・Conclusion:Recombinantreplicationdefectivelentiviralvectorcantransferintoinnerearthroughdifferentapproachesandgenerategeneproduct,andshowstherapeuticeffec

8、ttoASNHL.[Keywords]autoimmunitysensorineuralhearing1oss;genetherapy;lentiviralvector1979年McCabe通过对部分感音神经性聋患者的临床观察[1],首先提出自身免疫性感音神经性聋这一概念(autoimmimesensorineuralhearingloss,ASNHL),之后许多相关专家和学者对该病进行了大量的实验与临床研究，现已证实，ASNHL是一种临床疾病实体。作为目前极少数可以