多克隆细胞系的研究价值 ——j61人白血病细胞系30年研究评述

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1、多克隆细胞系的研究价值——J61人白血病细胞系30年研究评述【关键词】白血病细胞系ResearchValueofMulticloneCellLine：Amentforthe30thAnniversaryofJ61HumanLeukemicCellLine——EditorialAbstractJ61celllineisthefirstleukemiccelllineestablishedinChina.ItisamulticlonecelllineinfectedJ61celllinesinceitsesta

2、blishment30yearsago.Valuableinformationonleukemiccharacteristicsandfunctionsthestudiesonthiscellline,entsimpliedtheuniqueresearchvalueofmulticlonecelllines.ThismentfocusesattentiononresearchadvanceoftheJ61leukemiccelllinein30years,includingheterogeneityandmult

3、icloningofJ61cells,survivalmechanismofJ61cellpopulations,abnormalintercellalarmunicationofJ61cellsJ61cellline.Keyiccellline;multiclonecellline;herpesvirusinfection;leukemiccellscharacterization通常都认为细胞系是单克隆的，或者经过单克隆化的，是分析性实验研究和生物工程生产的常用工具。但是，有些细胞系实际上是多克隆的，例

4、如由人类疱疹病毒4型EpsteinBarr病毒（EBV）转化正常B淋巴细胞形成的淋巴母细胞样细胞系（lymphoblastoidcellline,LCL）是公认的多克隆细胞系，即由EBV同时转化多个正常的B淋巴细胞而成。LCL作为容易建系和培养的人类细胞模型在20世纪70-80年代的生物学和医学研究中发挥过很大作用，现在已经成为保留人类个体基因组的常规工具。但是作为严格的分析性研究，多克隆细胞系不是适宜的实验模型，近十多年来分子和细胞生物学研究已很少采用多克隆细胞系。J61是我们实验室在1976年建立的我国第一株人

5、类白血病细胞系［1］，为EBV和人类疱疹病毒6型(HHV6)双重感染的多克隆细胞系［2］，30年来J61细胞系提供了大量有关白血病细胞性质和功能的信息，在长期研究中我们体会到多克隆细胞系有其独特的性质，应该继续发挥其研究价值。J61细胞系的异质性和多克隆性从J61细胞系建系开始的细胞群体就表现出明显的异质性。培养初期以异型粒系和单核系细胞为主，随着传代次数的增加异型粒系细胞迅速减少，逐渐形成以淋巴样和单核样细胞为主的两大类细胞亚群，并伴有大量双核镜影细胞（ReedSternberg，RS细胞）。培养前患者

6、的骨髓标本，电子显微镜对其观察发现有疱疹病毒样颗粒，结合患者发病时有颈部包块，推测由Hodgkin淋巴瘤发展成急性白血病。从建系后的性质看J61细胞系应该分类为Hodgkin淋巴瘤细胞系［3］，按国际上通用的分类，属人类白血病细胞系。与J61细胞系性质相似的细胞系有德国学者于1986年建立的CrocoII，也是EBV和HHV6双感染的人白血病细胞系，由于CrocoII感染的是EBV1型，所以细胞增殖比感染EBV2型的J61旺盛［2］。多克隆细胞系的研究价值J61细胞群体的异质性表现在多方面：形态学观察大体

7、上可分为淋巴样细胞、单核样细胞、RS细胞和多核细胞；表面抗原分析显示，几乎所有的J61细胞都有HHV6早期膜抗原的高表达，同时有CD45和CD54以及HLADR的表达；按照表面抗原标记可以大体上分为两个亚群：高表达CD19+和CD20+的B淋巴样细胞亚群和CD15+的单核样细胞。值得注意的是J61细胞群体中可测出少数其他系列表面抗原的表达，如GlyA和CD34。有时甚至能分选出少量CD34+细胞。J61细胞群体的异质性反映出它的多克隆性，与LCL的异质性类似，但是比LCL更复杂，酷似Hodgkin淋巴瘤的状

8、况。J61细胞群体的多克隆性表型除了表面抗原呈现不同亚群外，用极限稀释法进行单个细胞培养从未成功；用96孔培养盘能够成功增殖繁衍J61细胞群体的最低细胞数是500细胞/孔，提示J61细胞群体中各不同细胞间的相互依赖性。J61细胞群体的生存机制J61细胞的生长繁殖除了要求较高的细胞浓度外，最明显的是接触依赖，即成丛生长。对