尿多酸肽对急性早幼粒细胞白血病细胞系凋亡作用的实验研究

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1、第3l卷第2期同济大学学报(医学版)VO1．3lNO．22010年4月JOURNALOFTONGJIUNIVERSITY(MEDICALSCIENCE)Apr．，2010doi：10．3969／j．issnl008—0392．2010．02．009·基础研究·尿多酸肽对急性早幼粒细胞白血病细胞系凋亡作用的实验研究蔡安民，万海英，周宏，李冬(同济大学附属同济医院检验科，上海200065)【摘要】目的探讨尿多酸肽(CDA—II)对NB4、NB4一Rl细胞的凋亡效应。方法应用细胞计数法、流式细胞术、DNAladder实验、R

2、T—PCR观察CDA一1／处理前后NB4、NB4一R1细胞生长增殖状况、凋亡情况及survivin基因表达的变化。结果实验组NB4、NB4～R1细胞生长、增殖均受到不同程度的抑制，细胞倍增时间延长。AnnexinV联合PI法细胞早期凋亡实验检测结果显示，随着作用时间的延长，活细胞数量逐渐减少．加药24h后细胞即明显凋亡，随后凋亡细胞进入死亡阶段，死亡细胞比例增加。DNALadder实验显示，加药96b后DNA断裂片断明显增多。RT—PCR实验证明，随着加药时间的延长，survivin基因在mRNA水平上的表达渐弱。结论

3、CDA一Ⅱ可以通过降低survivin基因表达的途径达到促进NB4、NB4一R1细胞凋亡的目的【关键词】尿多酸肽；白血病；凋亡；survivin基因【中图分类号】R557【文献标志码】A【文章编号】1008—0392(2010)02—0038～06InductionofapoptosisbyCDA—lIonacutepromyelocyticleukemiacellsCA1An—rain，WANHai—ying，ZHOUHong，LIDong(Dept．ofClinicalLaboratory，TongjiHospit

4、al，Ton~iUniversitySchoolofMedicine，Shangh~200065，China)【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectonapoptosisofNB4，NB4一R1cellsbyCDA一ⅡMethodsApoptosisofNB4，NB4一R1cellswereobservedbymeansofcountingthecells，DNALadder，flowcytometry，AnnexinV—PIandtheexpressionchangesofcorres

5、pondingapoptosisgene(survivinggene)byRT～PCR．ResultsCellgrowth—inhibitionexperimentsindicatedthattheexperimentalgroupsofNB4，NB4一R1cellgrowthandproliferationaresubjecttodifferentdegreesofinhibition．AnnexinV—PIexperimentindicatesthatthenumberoflivingcellsreducedgra

6、duallywiththeextensionoftheroleoftime．Cellapoptosiswasevidentbydosingafter24h．Thenapoptoticcellsenteredthedeathphase；DNALadderexperimentsindicatedthatDNAbreakagefragmentsincreasedgraduallyafterdosingfor96h．TheexpressionofsurvivingenediminuendoeatthemRNAleve1．Con

7、clusionCDA一ⅡcanreducetheexpressionofsurvivingenetoachievethepurposeofpromotingNB4、NB4一R1apoptosis．【Keywords】CDA一Ⅱ；leukemia；apoptosis；survivingene收稿日期：2009—12—23作者简介：蔡安民(1982一)，男，硕士研究生．E—mail：woaiheiyanjing@tom．COITI．通信作者：万海英．E-mail：whysz@163．net·38·第2期蔡安民等：尿多酸肽对

8、急性早幼粒细胞白血病细胞系凋亡作用的实验研究急性髓性白血病(acutemyeloidleukemia。成5组：对照组和加不同浓度CDA—lI的4个实验AML)是发生在成人中最普遍的异质性的恶性血液组，CDA一Ⅱ浓度分别为0．5mg／ml、1．0mg／ml、1．5肿瘤。急性早幼粒细胞性白血病(acutemg／ml、2．0mg／ml。