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1、ABO血型主要不合供者外周血造血干细胞采集和移植16例报告 1临床资料 1.1一般资料 16例供者均为血缘供者,与受者经人类白细胞抗原(HLA)配型为全相合,男性7例,女性9例,年龄中位数31.5岁(31.5±9.2岁)。16例受者中男性10例,女性6例,年龄中位数31.4岁(31.4±8.6岁),其中急性淋巴细胞白血病(ALL)7例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)3例(M21例、M41例、M51例),慢性粒细胞白血病(CML)5例,非霍奇金淋巴瘤(NHL)1例。16对供、受者ABO血型均不相合(ABO血型主要不合)。 1.2仪器与试剂 MCS+血细胞分离机和一次
2、性耗材(971E,美国血液技术公司),粒细胞集落刺激因子(GCSF,惠尔血,日本麒麟啤酒株式会社高崎医药工厂),ACDA血液抗凝剂(配方:枸椽酸钠22g/L,枸椽酸8g/L,葡萄糖24.5g/L;广州华南医疗用品有限公司)。 1.3供者PBSC的动员和采集 所有供者在采集前4d开始皮下注射GCSF5~10μg·kg-1·d-1。之后每天行血常规检查,监测供者外周血红细胞压积(HCT)、白细胞(NC)占有核细胞比例的变化情况。在注射后4d当供者外周血HCT为0.45左右、NC占有核细胞比例>0.10即可开始采集。采集时选择MCS+血细胞分离机的PBSC程序,安装一次性
3、耗材,根据供者的性别、身高、体质量、动员后HCT、NC数和所需采集的MNC数、CD34+细胞数设置采集参数[3]:每4~6个小循环后行一个再循环,再循环数:8~10个。小循环开始采集时限管线探测器(linesensor,LS)=70%,结束时限LS=12%,续采量20mL;再循环开始时限LS=70%,结束时限LS=12%,续采量7mL左右。采集与回输速度根据供者的具体情况调整(范围20~100mL/min)。采集过程中为防止血液引入管道后发生凝集,采用ACDA血液抗凝剂。全血与抗凝剂的比例保持在10∶1~12∶1。干细胞采集前口服10%葡萄糖酸钙10mL,采集过程中循环血量
4、每增加2000mL,口服10%葡萄糖酸钙10mL,以预防低钙反应[4]。 1.4移植物、受者的处理和移植物的输注 移植前从采集产品中留取样本检测MNC数、CD34+细胞数、MNC占有核细胞的比例、台盼蓝拒染率和混入红细胞的量;每次输注前10min给受者静脉滴注地塞米松5mg,并常规静脉滴注碳酸氢钠250mL,每日2次,以碱化尿液;每次采集产品未去除红细胞直接回输,输注速度5~10mL/min,输注结束后给予速尿20mg,并观察尿液颜色,且嘱受者全天多饮水。每日输液量控制在4000mL。 2结果 2.1采集不良反应 16例供者采集过程中2人次出现轻度口唇、手脚麻木等低
5、钙反应症状,给予口服10%葡萄糖酸钙10mL,症状消失。2.2采集产品细胞数16例供者每人经2次(1次/d,连续2d)采集,共采集32人次,平均每次采集产品含MNC数(3.86±0.53)×108kg-1(kg指受者体质量,下同)、CD34+细胞数(4.12±1.16)×106kg-1、MNC占有核细胞比例(93±2)%,台盼蓝拒染率均为100%,混入红细胞(4.5±0.5)mL(占产品体积的3%~4%)。 2.3采集产品输注结果 采集产品输注过程中,16例受者均未出现寒战、发热、腰背疼痛、呼吸困难、脉搏细弱、血压下降等溶血性输血反应表现。采集产品输注后,16例受者尿血红
6、蛋白、尿常规,血浆血红蛋白、游离胆红素,网织红细胞等未见异常。移植后中性粒细胞计数经12~14d恢复到>0.5×109L-1,经14~25d恢复到>2.0×109L-1。血小板计数经11~14d恢复到>20.0×109L-1,经14~27d回复到>50.0×109L-1。为防止ABO血型主要不合引起的输血反应及溶血现象,常用沉淀法或免疫吸附法清除产品中的红细胞,但这些方法复杂而又难以清除彻底[5];国外大部分移植中心采用血细胞分离机(IBM2991)直接通过Ficoll液分离出单个核细胞,大大降低了红细胞的混入量;目前新开展的异基因CD34+细胞移植更加避免了ABO血型主要不
7、合供者红细胞的输入。但以上方法在去除红细胞的同时,都不同程度的损失了一定数量的造血干细胞[56]。采用血细胞分离机采集供者PBSC可以避免采集骨髓时的麻醉及麻醉引起的意外,也可避免采髓的多点穿刺给供者带来的痛苦及一些后遗症;进行外周血造血干细胞移植,具有使受者造血及免疫功能重建和恢复快,且感染、出血等并发症少且轻等优点[1]。福建医科大学学报2008年7月第42卷第4期魏世金等:ABO血型主要不合供者外周血造血干细胞采集和移植16例报告MCS+血细胞分离机主要根据血液中各成分密度不同,离心杯中的全血被