柴芍承气汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道肌间神经丛nos神经元的影响

柴芍承气汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道肌间神经丛nos神经元的影响

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1、柴芍承气汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道肌间神经丛NOS神经元的影响:胡琼花,林中,刘颖,郑清华【摘要】  目的探讨肠神经系统在大鼠重症急性胰腺炎肠动力紊乱时的变化以及柴芍承气汤对大鼠肠道肌间神经丛内一氧化氮合成酶(nNOS)神经元表达的影响。方法将30只SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、柴芍承气汤组(CSCQD组);模型组和CSCQD组经胰胆管逆行注射质量浓度为50g/L的牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型后,分别给予生理盐水和CSCQD药液。测定大鼠的胃肠传递时间,HE染色光镜下观察胰腺的病理变化,用双重免疫荧光染色法观察回肠及结肠肌间神经丛NOS神经元的

2、变化。结果与模型组相比,CSCQD组传递指数(TI)明显升高(P<0.05),胰腺组织病理损害明显减轻(P<0.05),NOS神经元占总神经元的百分比明显降低(P<0.05)。结论CSCQD通过逆转肠神经系统NOS神经元的可塑性变化,改善SAP大鼠的肠动力,同时减轻了胰腺的病理损伤。【关键词】重症急性胰腺炎;柴芍承气汤;肠神经系统;一氧化氮合成酶ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethechangesofentericnervoussystemingastrointestinalmotilitydisorder

3、inratsyentericplexusofratintestinaltract.MethodsSDratslydividedinto3groups(10foreach):shamoperationgroup,modelgroupandChaishaoChengqiDecoction(CSCQD)group.SAPmodelodelgroupandCSCQDgroupratsbyretrogradeinjectionof50g/Lsodiumtaurocholateintothejunctionofthemonbileductandpancreaticd

4、uct.ModelgroupinisteredalsalineandCSCQDgroupinisteredissiontimeinedicroscope.Theneuronalnitricoxidesynthaseneuronsinthesmallintestinesandcolonicmyentericplexusmunofluorescentstaining.Resultsparedodelgroup,transmissionindexmunoreactiveneuronsmunoreactiveneurons,ChaishaoChengqiDeco

5、ctionimprovesthegastrointestinalmotilityinratsagesofthepancreas.  KEYolecularProbes公司;NOS1(R20)购自美国SantaCruz公司;TRITC标记山羊抗兔IgG(H+L)、FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)购自北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3仪器解剖显微镜Stemi2000CS,SIPNO.MIC00945系蔡司光学仪器(上海)国际贸易有限公司产品;OLYMPUS正置荧光显微镜系日本奥林巴斯仪器公司产品。  1.4方法  1.4.1SAP模型的建立  造

6、模前大鼠禁食24h,可自由饮水,质量浓度为250g/L乌拉坦4mL/kg腹腔内注射麻醉,开腹,辨认胰胆管及十二指肠乳头开口处;在肠系膜对侧肠壁上选一无血管区,用四号半针头经十二指肠乳头开口处探入胰胆管,顺其走向推进4~5mm后,用动脉夹夹住胰胆管开口及近肝门部胆管,接微量泵逆行泵入质量浓度50g/L牛磺胆酸钠(1mL/kg,0.1mL/min);2~3min后即可见胰腺充血、水肿、胰胆管扩张,维持8~10min后,松开动脉夹,拔针,将肠管复位,分层关腹;术后皮下补液(生理盐水10mL)。  1.4.2分组及给药方法  将30只SD大鼠随机分为3组:假手术

7、组(10只)开腹翻动十二指肠及胰腺后关腹,皮下补生理盐水10mL;术后1、2、3h,按1mL/100g经胃管灌服生理盐水;模型组(10只)制作SAP模型后1、2、3h按1mL/100g经胃管灌服生理盐水;CSCQD组制作SAP模型后1、2、3h按1mL/100g经胃管灌服柴芍承气汤。  1.4.3测定胃肠传递时间  3组大鼠术后24h灌服质量浓度10g/L台盼蓝1.5mL,30min后开腹,测定胃肠传递时间,用传递指数(TI)表示。台盼蓝被推进的长度(从幽门计起)与小肠全长之比,即为TI。  1.4.4标本的采集  3组大鼠观察腹腔内腹水情况、皂化情况及

8、胰腺的大体改变;切取胰腺放入福尔马林固定,常规石蜡包埋、切片,苏木素伊红(HE)

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