丹参酮ⅱa对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及tgfβ1表达的影响

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1、丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及TGFβ1表达的影响：蒋春明,陶娜娜,孙琤,张苗‘【摘要】目的：了解丹参酮ⅡA对腹腔注射腹膜透析液(PDS)大鼠腹膜组织学变化以及转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响。方法：50只SD雄性大鼠随机分为5组：对照组，每日用生理盐水腹腔注射20ml;PDS组，每日用4.25%的PDS腹腔注射20ml;丹参酮低、中、高浓度组，每日分别用含丹参酮ⅡA浓度为50、100、200mg·L-1的4.25%的PDS腹腔注射20ml。于实验第30天，取壁层腹膜行光镜检查，并用免疫组织化学的方法检测壁层腹膜TGFβ1的表达情况。结果：H

2、E、Masson染色显示，在PDS干预下腹膜厚度显著增厚，胶原沉积显著增多。与PDS组比较，丹参酮各组有不同程度腹膜厚度减少，胶原沉积减少。腹膜间皮细胞在PDS干预下分泌TGFβ1较对照组显著增加，丹参酮各组TGFβ1分泌与PDS组比较均有显著下降。结论:丹参酮ⅡA具有抑制葡萄糖PDS导致的实验大鼠腹膜纤维化及TGFβ1表达增加的作用。【关键词】丹参酮ⅡA;腹膜纤维化;转化生长因子β1;腹膜透析;大鼠[Abstract]Objective:ToinvestigatetheeffectsoftanshinoneⅡAonthealterationsinmorphology

3、andtheexpressionoftransforminggroembranesinaratmodelofperitonealdialysis.Methods:FiftymaleSpragueDalydividedintofivegroups(n=10ineachgroup).Intraperitonealinjectionof0.9%saline,standardlactatebuffered4.25%glucosebasedPDS,andstandardlactatebuffered4.25%glucosebasedPDSg·L-1)edforratsinea

4、chgrouponcedailyeof20mlperinjectionfor30days.Then,histologicalanalyses,includinghematoxylinandeosin(HE)stainingandMassonstaining,.Immunohistochemistryesothelialpactzonethicknessandaccumulationofsubmesothelialmatrix,as.TheperitonealchangesinducedbyPDSelioratedbytanshinoneⅡA.Conclusion:Longt

5、ermexposuretohighglucosebasedPDSresultsindamagesinperitonealmembranesandpromotesthefibrosingprocess.TanshinoneⅡAmaybehelpfulinsloembrane.[Keyinggrol;PDS组，每日用4.25%的PDS腹腔注射20ml;丹参酮低、中、高浓度组，每日分别用含丹参酮ⅡA浓度为50、100、200mg·L-1的4.25%的PDS腹腔注射20ml。于实验第30天，注射上述药物2h后氯胺酮(3ml·kg-1)肌肉注射麻醉，打开腹腔取壁层腹膜组织置于10%中

6、性缓冲甲醛中,断颈处死大鼠。1.2药物、主要试剂和仪器4.5%BaxterPDS为广州百特医疗用品公司产品,丹参酮ⅡA磺酸钠注射液为江苏科菲平医药有限公司产品，规格10mg·支-1。兔抗大鼠TGFβ1多克隆抗体购于美国SantaCruz公司，二步法免疫组化检测试剂(PV6001)购于北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3腹膜组织学检查取石蜡包埋的壁层腹膜组织，作2μm切片，60℃烘干融蜡，二甲苯脱蜡，梯度酒精水化并经蒸馏水充分漂洗，常规方法HE、Masson染色，光镜下观察病理改变。壁层腹膜厚度测量，选用HE染色切片200倍光学显微镜下观察，每张切片随机选取5个视野，每个视

7、野分5处测量，取其平均值作为腹膜厚度值。壁层腹膜Masson染色切片，200倍光学显微镜下观察胶原纤维分布，以蓝绿色为阳性信号，每张切片随机选取5个视野摄片，经ImageProPlus5.0图像分析系统(美国MediaCyberics公司)采集图像，分析其阳性信号的平均积分光密度(integratedODtotal,IOD)，取平均值。1.4TGFβ1的表达用免疫组织化学方法测定。取石蜡包埋的壁层腹膜组织，作2μm切片。石蜡切片经二甲苯脱蜡，梯度酒精水化并经蒸馏水充分漂洗后置于1mmol·L-1的E