谈五味子“生熟异用”之补肾阴作用

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1、谈五味子“生熟异用”之补肾阴作用五味子为木兰科藤本植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill的干燥成熟果实，功能收敛固涩，益气生津，补肾宁心。《本草纲目》记载五味子入嗽药生用，入补药熟用，即五味子生熟异用。前期实验比较五味子不同炮制品对肾阳虚小鼠的影响发现，五味子对肾阳虚小鼠脏器指数、激素水平都有积极影响，且炮制后作用增强。因五味子既补肾阳又补肾阴，故本课题分别比较生熟五味子的补肾阳和补肾阴作用，以说明五味子入补药熟用的炮制原理。目前临床常用炮制品种有醋五味子、酒五味子、蜜五

2、味子等，醋五味子为药典收载五味子唯一的炮制品种，但研究五味子的炮制沿革发现，醋五味子是近代新增的炮制品种，推测入补药熟用中的五味子可能是酒五味子。所以本实验比较五味子、醋五味子、酒五味子对肾阴虚小鼠的影响，为五味子生熟异用研究及临床合理应用提供依据。　　1材料　　1.1动物KM小鼠雌雄各半90只，体质量18～22g，由大连医科大学实验动物中心提供，动物合格证号为[SCXK(辽)2008-0002]。普通饲料，定时定量喂食，自由饮水。　　1.2药物与试剂五味子购自辽宁凤城五味子种植基地，由辽宁中医药大学药用植

3、物教研室王冰教授鉴定为北五味子。醋五味子制备:取净五味子加米醋拌匀，闷润1.5h，蒸制5h，50℃干燥至恒定质量。五味子-米醋为100∶20。酒五味子:取净五味子加黄酒拌匀，闷润1h，蒸制4h，50℃干燥至恒定质量。五味子-黄酒为100∶20。氢化可的松注射液(哈药集团制药总厂，批号H20023069)六味地黄丸(北京同仁堂药业，批号201209033)，环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷、肌酐、乙酰胆碱试剂盒(上海科兴商贸有限公司批号20120402B)。　　1.3仪器离心机(上海安亭科技公司TGL-16C)，分析天

4、平(上海天平仪器厂生产FA1004B)，酶标仪(上海赛默飞世尔仪器有限公司MK3)。　　2方法　　2.1药物制备五味子水提物的制备:分别取一定量五味子不同炮制品粗粉，加8倍量的水浸泡0.5h，煎煮3次，每次1h，滤过，合并滤液，浓缩，制成低、高剂量组(合生药量45、90mg/mL)。六味地黄丸药液制备:取六味地黄丸18g，加入100mL纯净水制成0.18g/mL混悬液。　　2.2分组及给药将90只KM小鼠雌雄各半随机分为9组，即空白对照组，模型对照组，阳性对照(六味地黄丸)组、生品低、高剂量组，醋制品低、高

5、剂量组，酒制品低、高剂量组，每组10只。除空白组与模型组灌胃生理盐水外，其他组灌胃相应药液，灌胃剂量均为0.02mL/g，连续11d，第7天开始除空白组外其他各组在灌胃同时腹腔注射氢化可的松注射液制造肾阴虚模型，0.2mL/只，连续4d。每3天称定质量，并记录观察精神行为状况。　　2.3取材第10天给药后禁食不禁水24h，第11天末次给药1h后采取摘眼球法取血约1mL，放入EP管中，于10000r/min的离心机中离心5min，取血清于EP管中，-20℃保存备用。分离肝、脾、两侧肾脏，用生理盐水洗净，滤纸拍

6、干，于分析天平称定质量。　　2.4指标测量激素指标测量:严格按照试剂盒说明书提供方法检测，经过稀释、加样、温育、洗涤、显色后于405nm处测定吸光度，计算即得。脏器指数测量:脏器分析天平称定质量，按照脏器指数=(脏器质量/体质量)1000进行计算。　　2.5统计学分析测定数据用x±s表示，采用SPSS12.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较使用成组t检验。　　3结果　　3.1对cAMP、cGMP及比值的影响模型组环磷酸腺苷(cAMP)较空白组升高明显，环磷酸鸟苷(cGMP)变化不明显，cA

7、MP/cGMP升高明显，治疗组较空白组cAMP升高幅度较模型组减少，有显著性差异，cGMP变化不明显，cAMP/cGMP介于模型与空白之间，与模型组存在显著性差异。各炮制品中酒制品最好，低、高剂量间无显著性差距，低剂量略好。　　3.2对Ach、Cr水平的影响模型组较空白组乙酰胆碱(Ach)降低，肌苷(Cr)升高，差异明显，治疗组较模型组治疗效果明显，酒制品效果最好，高低剂量间无显著性差异。　　3.3对脏器指数的影响空白组与给药组较模型组脏器指数高，酒品低剂量组效果最好，较其他组有显著性差异。　　4讨论　　目

8、前研究中常用的肾虚模型有两种，即甲状腺素肾虚模型和氢化可的松肾虚模型，对比发现甲状腺素所致模型为肾阴不足，虚火内生的甲亢肾虚模型，并非五味子主治证，故本实验采用注射氢化可的松造模。预实验中以进食量，进水量以及小鼠大便状态为指标，考察腹腔注射、皮下注射、后肢肌肉注射造模效果，腹腔注射效果最好，注射一天后小鼠进食量明显减小，进水量增加，大便干结，故选用腹腔注射。氢化可的松肾阴虚模型关键在于短程、大剂量，造模时间长容易