松龄血脉康胶囊对自发性高血压大鼠raas系统的调控机制讨论

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1、松龄血脉康胶囊对自发性高血压大鼠RAAS系统的调控机制讨论高血压的发病机制复杂，其中肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosteronesystem，RAAS)是调节血压的重要途径之一。目前降压药物的开发研究也多是围绕RAAS展开。根据临床经验和以往的基础研究，松龄血脉康胶囊具有一定的降压作用。因此本研究就松龄血脉康胶囊对自发性高血压大鼠的降压效果和对RAAS的调节作用进行研究，为今后临床用药及相关研究提供一定的实验依据和理论参考。　　材料　　1.动物　　10

2、周龄SPF级雄性自发性高血压大鼠(spontaneouslyhypertensiverat，SHR)24只，体质量(250±20)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2007-0001，饲养于室内通风橱内，恒温(22±2)℃，自然昼夜，自由取食及饮水。　　2.药品和试剂　　雷米普利(5mg/片)由赛诺菲安万特(北京)制药有限公司生产，批号：C0001;松龄血脉康胶囊(0.5g/粒，含葛根、珍珠层粉等)由成都康弘制药有限公司生产，批号：10

3、0513。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)、醛固酮(aldosterone，ALD)放射免疫试剂盒购自北京北方生物技术研究所;实时定量PCR试剂均购自天津市灏洋生物制品科技有限公司，引物由上海生物工程有限公司合成。　　3.主要仪器　　无创鼠尾压测量仪(BP98Ama;-放射免疫计数器(中国科学技术大学科技实业总公司);DY89-1实时定量PCR仪-Linegene9620(BIOER);PCR仪-杭州博日科技有限公司TC-96/g/h(b)。　　方法　　1.分组SHR大鼠24只

4、，平衡血压2周后随机分为3组(空白组、中药组、西药组)，每组8只。各鼠每日相同时间灌胃给药1次，其中中药组每天以松龄血脉康胶囊20mg/kg灌胃;西药组每天予以雷米普利1mg/kg灌胃，空白组给予同体积的0.9%氯化钠溶液灌胃，连续4周。　　2.检测指标　　2.1血压测定采用尾动脉无创测压法。在干燥、通风、安静的环境中将大鼠置于37℃恒温袋内预热10min，使大鼠尾动脉充分扩张，将传感器套在鼠尾根部，待大鼠短暂躁动停止后，连续测定3次取平均值作为血压。　　2.2血浆AngⅡ、ALD含量测定取大鼠

5、腹主动脉血，快速加入含有肝素的离心管中，颠倒混匀，4℃、3000r/min离心5min，取上清液，参照ALD和AngⅡ测定试剂盒说明书，进行放射免疫分析测定。　　2.3肝脏血管紧张素转化酶(angiotensin-convertingenzyme，ACE)、血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype1recepto，AT1R)mRNA表达量测定大鼠腹主动脉取血后，取肝脏使用Trizol试剂提取总mRNA，引物序列见表1。取总RNA1μg，按照说明书进行逆转录合成cDNA。荧光定

6、量PCR反应条件为：95℃，15min;95℃，20s;AT1R57℃，ACE54℃，20s;40个循环，反应体系为20μL。选取15-25个扩增循环数(cyclethreshold，Ct)的荧光信号，计算3个平行复孔的扩增效率，计算ΔCt(=Ct目的基因-Ct内参基因)和ΔΔCt[=(Ct实验组目的基因-Ct实验组内参基因)-(Ct对照组目的基因-Ct对照组内参基因)]，并计算实验组目的基因与对照组目的基因的差异表达量2-ΔΔC

7、t(=实验组目的基因/对照组目的基因)。　　3.统计学方法　　采用SPSS13.0统计软件进行分析，计量资料以x-±s表示，各组间比较采用方差分析进行统计处理。显著性差异水平定为0.05。　　结果　　1.松龄血脉康胶囊对SHR大鼠血压的影响。3组大鼠基础血压无差别;用药2周时，与空白组比较，中药组血压开始有差异(P<0.05);用药4周，与空白组比较，中药组有显著差异(P<0.01)。与空白组比较，中药组血压稳定，没有上升。说明中药能有效抑制血压的升高，使血压维持在稳定

8、的水平。用药4周，中药组血压虽然没有明显变化，但整体上有逐渐下降的趋势。　　2.松龄血脉康胶囊胶囊对SHR大鼠AngⅡ和ALD的影响见表3。用药4周后，检测各组大鼠血浆AngⅡ、ALD含量。AngⅡ含量，与空白组比较，中药组和西药组均显著降低(P<0.01);ALD含量，与空白组比较，中药组和西药组也都显著降低(P<0.01)。　　讨论　　高血压已成为危害人类健康的主要危险因素。其发病机制复杂，一般认为RAAS功能失调是高血压发病的关键机制。目前治疗高血压药物的作用靶点也多是针对RA