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《p38mapk抑制剂对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的作用机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、p38MAPK抑制剂对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的作用机制 急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)是一种常见的急腹症,分为轻症急性胰腺炎(mildacutepancre-atitis,MAP)和重症急性胰腺炎(severeacutepancre-atitis,SAP)。其中轻症急性胰腺炎症状较轻,预后较好,死亡率低。而重症急性胰腺炎由于炎症扩大作用,常引起全身炎症反应综合征(systemicinflam-matoryreactivesyndrome,SIRS),危及到机体多个器官,病情凶险
2、,进展迅速,病死率极高。其中急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)是重症急性胰腺炎常见的并发症之一,也是患者早期死亡的主要原因,其发病机制尚未阐明,所以目前仍无有效的特异性的治疗方法。而近年来研究显示p38MAPK信号转导通路是重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的重要机制,所以本文通过实验研究探讨分析p38MAPK抑制剂对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用,现将结果报道如下。 1、资料与方法 1.1一般资料选购哈尔滨医科大学动物实验中心雄性健康SPF级Sprague-Dan;20)g。所有动物
3、于实验前12h禁食,不禁水,饲养环境为标准明暗周期。 实验试剂主要有牛磺胆酸钠,p38MAPK抑制剂SB203580,均由美国Sigma公司提供。 1.2实验方法 1.2.1动物分组及模型建立采用随机数字表法将60只健康成年的雄性SD大鼠分为三组,A组为假手术组,B组为重症胰腺炎模型组,C组为重症胰腺炎模型加p38MAPK抑制剂SB203580组。A组动物开腹后进行胰胆管注射生理盐水,并将十二指肠和胰腺进行翻动。B组动物开腹后进行胰胆管逆行穿刺注射5%牛磺胆酸钠,建立重症急性胰腺炎模型。C组动物在进
4、行造模前1h向所有动物体内注射p38MAPK抑制剂SB203580,剂量为1mLkg-1体重,然后同B组动物建立重症急性胰腺炎模型。 1.2.2检测方法分别于模型建立后0.5、6、12h取动物的肺脏组织进行观察指标的检测。取肺组织进行HE染色切片制作(全部动物均未死亡,取材于动物麻醉下实施),光学显微镜下观察肺组织病变,并根据Hofbaue法以肺实质组织和空肺泡面积百分比对肺损伤进行病理学评分。取固定量肺组织先称量出组织的湿重,然后将组织置于烤箱中烘烤后,称量组织的干重,计算出肺组织湿干重比。 采用紫
5、外分光光度计检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)的活性。采用RT-PCR法检测肺组织中p38MAPKmRNA的表达水平,GAPDH和p38MAPK上下游引物序列如下:GAPDH:F:5-TGAAGGTCG-GTGTCAACGGATTTGCC-3,R:5-CATGTAGGC-CATGAGGTCCACCAC-3,产物长度为999bp。p38MAPK:F:5-GTGTCGGTGATGTCAGATGG-3,R:5-CAGTATGCAGTCCAGCTCCA-3,产物长度为687bp。 1.3统计学方法应用SPSS19
6、.0软件进行数据分析。观测资料主要是计量数据,采用均数±标准差(x±s)表示。多组间的比较为单因素方差分析,两两组间的比较为成组t检验。总显著性水准α=0.05。 2、结果 2.1大鼠肺组织损伤病理学检查三组大鼠肺组织损伤病理学评分结果见表1,得出随着时间的推移B组和C组大鼠肺组织损伤病理评分均逐渐升高,P<0.05,差异具有统计学意义;同时B组与A组相比,大鼠肺组织损伤病理评分于三个时间点都显著升高,P<0.05,差异具有统计学意义;而C组与B组相
7、比,大鼠肺组织损伤病理评分于三个时间点有所降低,P<0.05,差异具有统计学意义。病理变化见图1~3。 2.2大鼠肺组织湿干重检测三组大鼠肺组织湿干重比较结果见表2,得出随着时间的推移B组大鼠肺组织湿干重比逐渐升高,P<0.05,差异具有统计学意义;同时得出B组大鼠肺组织湿干重比于三个时间点都显著升高于A组,P<0.05,差异具有统计学意义;而C组大鼠肺组织湿干重比于三个时间点都低于B组,P<0.05,差异具有统计学意义。 2.3大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性检测三组大
8、鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性检测结果见表3,得出随着时间推移A组、B组及C组大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性逐渐升高,P<0.05,差异具有统计学意义;同时得出B组大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性于三个时间点都显著升高于A组,P<0.05,差异具有统计学意义;而C组大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性于三个时间点都低于B组,P<0.05,差异具有统计学意义。 2.4大鼠肺组织p38MAPK
