二氧化硫对小鼠不同组织器官的氧化损伤作用solt2gt是一种全身性毒物

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1、二氧化硫对小鼠不同组织器官的氧化损伤作用：s0：是一种全身性毒物孟紫强张波秦国华山西大学环境医学与毒理学研究所山西大学生命科学与技术学院太原030006摘要对小鼠进行二氧化硫(SO：)染毒处理，测定s0。吸入后6种脏器(脑、肺、心、肝、脾、肾)的抗氧化酶(SOD、GsH—Px)活性及抗氧化物质(GSH)和脂质过氧化作用(LPO)的水平。结果表明，(1)SOz吸入引起所有所试脏器抗氧化酶活性降低，GSH含量下降及脂质过氧化作用升高；(2)SO。对小同脏器引起的氧化损伤程度不同，存在器官差异．尤其以脑、心、肝、肺更为严重；(3)雌、雄有一定差别。由此得出结

2、论：(I)通过过氧自由基引起组织细胞的氧化损伤可能是sO。毒理作用的主要机制；(2)SO：是一种全身性毒物，它可能引起多种组织器官损伤和疾病。关键词一氧化硫氧化损伤脂质过氧化作用全身性毒物小鼠二氧化硫(S02)是当前主要大气污染物，对人体健康危害甚大。一般认为S02对呼吸道粘膜有腐蚀和刺激作用，可引起气道阻塞性疾病，如气管炎、哮喘、肺气肿等多种呼吸道疾病，甚至与肺癌的发生有关⋯，因此，人们更多的是关注它对呼吸系统的危害，至于S02对机体其它多种器官、系统有无危害作用，却往往被忽视，迄今未见文献报道。此外，S02被吸入体内以后，经过代谢转化可形成各种硫中

3、心自由基和氧中心自由基，并导致超氧阴离子自由基的形成。最近本室研究表明S02吸入可引起大鼠脑组织和红细胞SOD酶活性下降、脂质过氧化作用增高¨。J，设想这些自由基可引起机体氧化损伤作用，从而造成S02各种毒理作用。在这种假设的基础上，本文研究了S02吸入对小鼠不同组织器官的氧化损伤作用，提出了S02是一种全身性毒物的新观点。1材料与方法11动物准备及组织匀浆液制备将40只昆明纯系小鼠(18—209、5周龄)，雌、雄各半，随机分为对照组和SO。吸入组，每组雌、雄各10只小鼠。sOz吸入组小鼠接受so,(84mg／m3)染毒(在玻璃染毒箱中进行)，每天4h

4、，共7d；对照组在同类大小的染毒箱中接受过滤的新鲜空气。染毒箱内soz浓度采用盐酸副玫瑰苯胺分光光度法测定。动物自由进食和饮水(自来水)，每周计算进食量并称量体重。s02染毒结束后禁食24小时脱颈处死，立即取出脑、肺、心、肝、脾、肾等6个器官组织，在冰冷的生理盐水中剪碎，在0-4"C下用含有I．17％KCI的0．imolJL磷酸缓冲液(pH7．4)匀浆，各组织与缓冲液的比例为1：10(w／v)。匀浆液通过二层纱布过滤后在4"C下10000×g离心20min，取上清液立即进行各指标的测定。12抗氧化酶活性与谷胱甘肽含量的测定一700——超氧化物歧化酶(C

5、u、Zn—SOD)活性测定：采用改进的抗坏血酸(维生素C)终止法，在420nm读光密度(OD)值”J。邻苯三酚自氧化率的OD值控制在006—0．07／rain。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．Px)活性测定：采用DTNB直接法进行15J。以过氧化氢(H202)为底物，5,5’二硫代．坝．2．硝基苯酸(DTNB)显色液(含004％DTNB，1％柠檬酸二钠)，在5min9,J在422nm读光密度(OD)值。过氧化氢酶(CAT)活性测定：按照Claiborne的方法”。。以过氧化氢(H202)为底物，在25℃测240nmOD值的变化速率，以每分钟降解1nmol／

6、LH202为1个活性单位。谷胱甘肽(GSH)含量测定：总谷胱甘肽含量按照Jollow等的方法171进行。主要方法为：取lmL组织匀浆上清液加入ImL4％磺基水扬酸以沉淀残留蛋白，4℃r静置1h，3000×g低温离心15min。样品测定混合物总体积为3mL，其中含01mL组织匀浆上清液，27mL磷酸缓冲液(0．1mol／L，pH7．4)及0．2mL5,57一二硫代．双．2-硝基苯酸(DTNB)显色液。室温下加DTNB显色液4rain，立即在420111"0．测定OD值。各组织中GSH含量nmol／mg蛋白质通过与标准曲线OD值比较而求得。1．3脂质过氧化

7、作用的测定通过测定硫代巴比妥酸反应物(TBARS)的水平，以1，l，3，3．四乙氧基丙烷为准，计算脂质过氧化产物一丙二醛(MDA)的含量，以表示细胞脂质过氧化水平¨J。14蛋白质含量测定采用Lowry方法测定蛋白质含量p】。15统计学分析应用t-检验法检验S02染毒组与对照组之间的差异显著性。2结果与分析21SOD酶与S02表1总结了S02吸入对小鼠不同组织器官cu，Zu．SOD酶活性影响的研究结果。从表1可知，昆明纯系小鼠每天吸八浓度为84mg／ra3的S024h，共吸入7d，对于雄小鼠，所试全部器官(脑、肺、心、肝、脾、肾)，除肝、脾之外，其余脏器

8、SOD酶活性均比对照组下降明显，尤其是脑、心的SOD酶活性比肺的下降更为显著；对于雌小鼠，除肝