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时间:2018-12-05
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1、鱼腥草对吸烟小鼠的抗肺氧化损伤作用王勤,李华文,廖芸芸,吴铁【摘要】 目的观察鱼腥草对吸烟小鼠肺组织抗氧化损伤的影响。方法以烟熏法制备被动吸烟小鼠模型。昆明小鼠60只随机分为3组:A组为正常对照组;B组为吸烟模型组,连续被动吸烟,15min/次,8次/d;C组为吸烟+鱼腥草组,在连续吸烟的同时,0.1ml/10g鱼腥草提取液灌胃,2次/d。60d后处死动物,取肺组织做成匀浆。观察鱼腥草对吸烟小鼠肺组织中谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响。数据经t检验统计分
2、析。结果鱼腥草提取液可以明显提高肺组织中GSH-Px活性、SOD活性以及降低MDA含量。结论鱼腥草对被动吸烟小鼠所致肺组织氧化损伤有一定的保护作用。【关键词】鱼腥草超氧化物歧化酶丙二醛抗氧化被动吸烟 吸烟虽然可以满足吸烟者的某些需要,但它对己对人带来的危害,是不容争辩的事实。研究证实,吸烟过程产生含有包括超氧自由基在内的复杂有害成分的烟气,可导致人体多种疾病发生,而支气管、肺组织作为烟雾直接作用器官,受害程度尤为严重。吸烟所致肺氧化损伤实质上是烟雾刺激气道后氧化应激过强所致以巨噬细胞和中性粒细胞为主的多种炎症细胞
3、参与的气道慢性炎症反应〔1〕。中医中药在抗氧化抗炎方面具有得天独厚的优势,因此,挖掘祖国医药宝库,从中寻找对抗烟叶燃烧产生的超氧阴离子自由基的有效药物,抑制气道炎症,成为防治吸烟造成肺损伤的重要途径之一。本文通过动物实验,建立小鼠香烟烟雾肺损伤模型,观察了中药鱼腥草对吸烟小鼠肺组织氧化损伤的保护作用。现报道如下。 1材料与仪器 1.1药品及试剂 鱼腥草,由广东医学院药理教研室提供。粉碎,加水10倍,加热提取,1h/次,共提取3次,合并3次滤液,浓缩成含生药100%提取液,4℃冰箱保存。其余试剂均采用国产分析纯
4、。SOD、MDA、GSH-Px检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 1.2仪器 752型分光光度计,匀浆器、电磁振荡器等。小鼠吸烟箱,自制,容积10L,有机玻璃制成,顶部安装玻璃漏斗存放烟丝,底部与抽风系统相连,可以模拟人的吸烟速度,能使主流、测流烟雾全部进入吸烟箱内,下侧部有一直径5cm的孔与大气相通。 1.3烟丝 广东省廉江烟丝厂生产。 1.4动物 昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,由广东医学院实验动物中心提供。 2方法 2.1分组昆明种小鼠60只。观察3d无异常后,按体重随机分3组,
5、即正常对照组(A组)、吸烟模型组(B组)、吸烟加鱼腥草组(C组),每组20只,雌雄分笼饲养。B组和C组均连续吸烟60d,8次/d(上午4次,下午4次),15min/次,每次烟熏后换气休息15min;吸烟前,B组用0.1ml/10g体重生理盐水灌胃,C组用0.1ml/10g体重鱼腥草提取液灌胃,2次/d。实验期内,动物自由进食饮水,每10天称体重,30d时,采血测血清硫氰酸根离子(S-)含量以观察模型的制成。处死前称重。 实验结束的第2天,眼眶采血并宰杀动物,以1%肝素抗凝、3000r/min离心10min制备血清
6、;取出肺组织称重,剪取部分右肺,用预冷生理盐水制成10%的肺组织匀浆,-80℃冻存待测。 2.2测定指标及方法 血清中的硫氰酸根离子(S-)含量测定参照Bol,显著高于A组(P<0.05)。吸烟60d后,B、C组的小鼠的血清S-含量增高到50ng/ml左右,极显著高于A组(P<0.01)。表明小鼠已经有效吸入香烟烟雾。表1小鼠血清S-含量(略) 3.2吸烟小鼠体重和肺重的变化 实验期内动物摄食、饮水及活动等均未见异常。各组小鼠体重增长情况见表2。吸烟30d后,吸烟各组的体重增长与正常对照组无明显差别,吸烟6
7、0d后,吸烟模型组小鼠体重明显低于正常给药组(P<0.05),C组和正常对照组的体重无显著性差异。各组小鼠肺重的情况见表3。B、C组肺重均低于A组,其中,B组和正常对照组之间有显著差异(P<0.05)。表2实验期小鼠的体重变化(略)表3吸烟对小鼠的肺重的影响(略) 3.3小鼠肺组织中的生化指标测定结果 各组小鼠肺组织的MDA含量、SOD活性以及GSH-Px活性比较见表4。结果表明,B组小鼠肺组织中的MDA含量显著高于对照组A组(P<0.05),SOD活性、GSH-Px活性显著性的低于A组;C组小鼠肺组织中MDA
8、含量、SOD、GSH-Px活性水平接近A组,说明了鱼腥草对被动吸烟小鼠的脂质过氧化损伤有保护作用。表4小鼠肺组织中的MDA含量、SOD活性和GSH-Px活性(略) 4讨论 香烟的烟雾中含有数千种对人体的健康具有严重危害的复杂化学物质,氢氰酸是其中之一,它在体内被肝脏解毒,而生成硫氰化物。S-的半衰期较长,可达10~14d,因此可以通过测定血清的S-含量考
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