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1、精品论文单色光对早期肉鸡小肠黏膜形态结构的影响1谢电，陈耀星*，王子旭，董玉兰中国农业大学动物医学院，北京（)E-mail:yxchen@cau.edu.cn摘要：目的：研究单色光对早期肉鸡小肠黏膜形态结构的影响，为阐明单色光对早期肉鸡黏膜发育的作用机理提供形态学依据。方法：采用LED（Light-emittingdiodes）灯作为光源，选用刚出壳AA雄性肉鸡120只，随机分为红（660nm）、绿(560nm)、蓝(480nm)和白(400～700nm)4个光源处理组，每个处理设6个重复，每个重复5只鸡，人工光照光强度均为15lx,光照时间为23h，试验期为7
2、天；分别于0、7日龄时每个重复随机选取1只鸡取材,采用组织化学染色方法及免疫组织化学方法检测肉鸡十二指肠、空肠、回肠的黏膜结构变化、杯状细胞数量以及空肠肠腺上皮细胞的增殖。结果：7日龄时绿光组与其他光色组相比，能够促进肉鸡生长早期空肠肠腺上皮细胞的增殖，提高小肠绒毛上皮的杯状细胞数量,增加小肠绒毛高度、黏膜厚度以及绒毛高度/隐窝深度比值。结论：在15lx光强度下,肉鸡生长早期选用绿光照明,可不同程度地改善肉鸡小肠黏膜结构，提高小肠对营养物质的吸收能力,从而促进肉鸡生长发育。关键词：单色光；肉鸡；小肠黏膜；杯状细胞；PCNA阳性细胞众所周知，小肠黏膜的正常结构是营
3、养物质消化与吸收的基础,特别是小肠绒毛高度、黏膜厚度以及绒毛高度与隐窝深度的比值（V/C）是衡量小肠消化吸收功能的重要指标[1，2]。肉鸡刚孵出时，消化道发育还不成熟，体内的营养需求主要是由卵黄囊提供。孵出后机体的营养需求改由全价饲料供应，前7天的消化吸收对提高肉鸡生产性能至关重要。为适应生长的需要，肉鸡小肠的黏膜形态结构会发生相应的变化[3]。光环境因素对禽类的行为、生产性能和健康状况具有重大的影响，是影响鸡生产力表现的主要因素之一。有报道认为影响家禽生产力表现的诸因素中，遗传力只占5%～50%，而50%～95%则取决于环境条件[4]。因此，现代养鸡业普遍采用
4、人工控制光照时间和光照强度来促进鸡的生产性能。我们的前期实验发现绿光在生长前期(0－26日龄)能促进肉鸡的生长,这说明绿光能提高肉鸡的早期生产性能[5]。但是，关于单色光改善肉鸡肠道黏膜结构的研究至今还未见报道。由于肉鸡在刚出壳7天里小肠的消化吸收功能会发生显著变化，本实验研究不同单色光对肉鸡在生长早期（7日龄）小肠黏膜形态结构的影响，阐明单色光对早期肉鸡小肠黏膜发育的作用机理以及为单色光在育雏早期的进一步应用提供肠道形态学依据,对养禽业合理利用单色光提高育雏早期的生产性能具有重要的理论意义。1.材料与方法1.1动物处理选用刚出壳AA雄性肉鸡120只,购自北京爱
5、拔益加家禽育种有限公司，于两层笼具内饲养，随机分为4个光照组，即：蓝光组(B)、绿光组(G)、红光组(R)和白光组（W），每组6个重复每个重复5只鸡。4组鸡分别接受相应光色处理，试验期为7d，光源为发光二级管（LED，中山市晶明光电科技有限公司制造），光的波长分别为660nm（红）、560nm（绿）、480nm（蓝）1本课题得到高等学校博士科学点专项科研基金（）、北京市自然科学基金（）和新世纪优秀人才支持计划（NCET-04-0126）的资助。-9-精品论文和400～700nm（白），光照强度为15lx，照明时间为23h（0点～23点）。各试验组的其他饲养管理相
6、同，参照北京爱拔益家家禽育种有限公司肉鸡饲养管理手册配制日粮，自由采食与饮水，鸡舍人工控温。试验鸡按常规肉鸡免疫程序进行免疫。1.2样品采集和处理各组分别在0、7日龄时从各个重复随机选取1只鸡剖杀,分别采集十二指肠（派依尔节处）、空肠（卵黄蒂处）和回肠（回盲口处）各1cm，用生理盐水冲洗干净,置于80％酒精或4％多聚甲醛磷酸缓冲液(pH7.4)固定48h,石蜡包埋,连续切片,厚5um。1.3检测指标和方法1.3.1HE和免疫组织化学染色部分十二指肠、空肠和回肠的切片均进行常规HE染色，应用Moditec照相处理软件,每只鸡的每个肠段选取5张切片(每隔5张切片取1
7、张)，每张切片选取10个完整走向平直的最长肠绒毛，测量绒毛的高度(以肠腺绒毛连接处到绒毛顶端为准)、相邻绒毛的隐窝深度(以肠腺绒毛连接处到肠腺基部为准)以及相应黏膜厚度，并计算绒毛高度与隐窝深度的比值（V/C），各指标取平均数作为测定数据。部分空肠的切片按常规免疫组织化学SP法染色。石蜡切片常规脱蜡至水，用100％甲醇配制的3％H2O2封闭内源性过氧化物酶30min和10%正常犊牛血清室温下作用30min后,加小鼠抗人增殖细胞核抗原（PCNA）单抗(1：2500倍稀释，Sigma公司产品)，4℃过夜；PBS洗涤后,分别用生物素标记马抗小鼠IgG二抗(室温、2h，
8、北京中山公司产品)和辣根
