2016-赵卓-土壤中产淀粉酶菌株的分离、筛选和初步鉴定

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1、学士学位论文(设计)题目:土壤中产淀粉酶菌株的分离、筛选及初步鉴定姓名:赵卓学号:2012033007学院:生命科学与技术学院专业/届别:生物技术(检验检疫)/2016届指导教师:弥春霞职称:副教授独创性声明本人郑重声明:所呈交的学士学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:签字日期:年月日目录

2、1引言12材料与方法12.1材料12.1.1实验材料12.1.2药品22.1.3主要仪器22.1.4培养基22.2实验方法22.2.1实验试剂的配制22.2.2样品采集32.2.3产酶菌株初步分离32.2.4产酶菌株的初筛42.2.5产酶菌株的复筛42.2.6酶活力测定42.2.7菌株的鉴定53结果与分析63.1产酶菌株初步分离结果63.2产酶菌株的初筛结果63.3产酶菌株复筛结果73.3.1葡萄糖标准曲线绘制73.3.2酶活测定83.4菌株ZG-3初步鉴定93.4.1菌落形态93.4.2显微形态94讨论95结论10参

3、考文献11致谢12摘要目的:本文主要对高产淀粉酶菌株进行分离、筛选和鉴定。方法:以土壤为实验材料,结合稀释涂布法和碘显色法分离产酶菌株;利用3,5-二硝基水杨酸比色法测定产酶菌株的酶活力;通过形态学检测方法对高产酶活菌株进行初步鉴定。结果:从土壤中共分离出23株产酶菌株,编号为ZG-3菌株发酵液酶活力最高,达281.7U/mL。对ZG-3菌株进行了初步鉴定,结果该菌株为革兰氏阳性菌,菌体杆状、中生芽孢,为一株芽孢杆菌菌株。关键词:淀粉酶;初筛;复筛;酶活性;鉴定AbstractObjective:Inthispaper

4、,theisolation,screeningandidentificationofhighyieldingamylaseproducingstrainswerecarriedout.Methods:Tosoilastheexperimentalmaterial,combinedwithdilutioncoatingmethodandiodinecolorationmethodseparationenzymeproducingstrain;colorimetricmethodforthedeterminationoft

5、heenzymeactivityoftheenzymeproducingstrainsby3,5-Dinitrosalicylicacid;bymorphologicalmethodsofproducingenzymestrainswerepreliminarilyidentified.Results:23strainsofenzymeproducingstrainswereisolatedfromthesoil,andtheenzymeactivityofthefermentationbrothofZG-3washi

6、ghest,whichwas281.7U/mL.ZG-3strainswereidentifiedpreliminarily,andthestrainwasgrampositivebacteria,whichwasaBacillusstrain.Keywords:amylase;screening;rescreening;enzymeactivity;evaluation1引言淀粉酶(amylase)是一类可以水解淀粉,使淀粉降解成葡萄糖、麦芽糖以及一些低聚糖酶类总称[1]。淀粉酶按照水解类型可以分为α-淀粉酶(α-a

7、mylase)、β-淀粉酶(β-amylase)、γ-淀粉酶(γ-amylase)和异淀粉酶(isoamylase)。α-淀粉酶广泛地存在于动植物和微生物中。它是一种内切葡糖苷酶(enddoglucosidase),随机作用于淀粉链内部的α-1,4糖苷键。α-淀粉酶降解直链淀粉(amylose)时生成葡萄糖,少量麦芽糖和麦三糖(maltotriose);降解支链淀粉(amylopectin)或糖原,最终产物是葡萄糖,麦芽糖、麦三糖和α-极限糊精(α-limit-dextrin)或称α-糊精。β-淀粉酶主要存在于高等植物

8、特别是发芽的种子如大麦芽中。它是一种外切葡糖苷酶(exoglucosidase),从淀粉的非还原端开始断裂α-1,4糖苷键,逐个除去二糖单位,产物是β-麦芽糖。异淀粉酶作用于β-淀粉酶不能断裂的α-1,6糖苷键。γ-淀粉酶又称糖化酶,它是一种外切酶,既可以从淀粉的非还原端依次切割α-1,4糖苷键,又可以切割α-1,6糖苷键,最终产

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