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《龙眼体胚cdc48基因的克隆_原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、热带亚热带植物学报 2014，22(3)：233~241JournalofTropicalandSubtropicalBotany龙眼体胚CDC48基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析1,21*1,21111陈义挺,赖钟雄,方智振,蔡英卿,林玉玲,李焕苓,陈登云(1.福建农林大学亚热带果树研究所，福州350002；2.福建省农业科学院果树研究所，福州350013)摘要：为探讨龙眼(Dimocarpuslongan)体胚CDC48基因的表达方式，采用RT-PCR和RACE方法，从龙眼胚性
2、愈伤组织中克隆得到1条长度为2620bp、含有完整开放阅读框的DlCDC48基因cDNA序列(GenBank登录号：EU606206)和长度为2418bp的DNA序列(GenBank登录号：FJ590953)。DlCDC48编码1个含有805个氨基酸的蛋白质。DlCDC48基因不含内含子。生物信息学分析表明：DlCDC48蛋白为不具跨膜结构域的亲水性胞质蛋白，不具有信号肽，定位在细胞核；与其他植物的CDC48有较高的同源性。将DlCDC48基因构建成原核表达载体，经IPTG诱导表达了1个分子量约为8
3、9kD的蛋白。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术，DlCDC48在龙眼体胚发育过程中的各个阶段均有表达，其中球形胚时的表达量最低，胚性紧实球形结构阶段的表达量最高。这为进一步研究CDC48基因在植物体胚发生中的作用奠定基础。关键词：龙眼；体细胞胚胎发生；CDC48基因；生物信息学doi:10.3969/j.issn.1005–3395.2014.03.004CloningandProkaryoticExpressionofCDC48,andItsExpressionduringSomaticEm
4、bryogenesisinDimocarpuslonganLour.1,21*1111CHENYi-ting,LAIZhong-xiong,FANGZhi-zhen,CAIYing-qing,LINYu-ling,LIHuan-ling,1CHENDeng-yun(1.InstituteofHorticulturalBiotechnology,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou350002,China;2.InstituteofFruit,Fu
5、jianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou350003,China)Abstract:InordertounderstandtheexpressionofCDC48fromembryoofDimocarpuslongan,a2620bpcDNAsequence(GenBankaccessionNo.:EU606206)withcompleteORFanda2418bpDNAsequence(GenBankaccessionNo.:FJ590953)wasclon
6、edfromcalliofDimocarpuslongan,namedDlCDC48gene.TheDlCDC48geneisintronless,encoding805aminoacids.BioinformaticanalysisindicatedthatDlCDC48wasahydrophiliccytoplasmicproteinwithouttransmembranedomainandsignalpeptide,locatedinnucleus.Theaminoacidsequenceha
7、dhighsimilaritybetweenDlCDC48andCDC48fromotherplants.ProkaryoticexpressionvectorfusedwithDlCDC48wasconstructed,andaproteinabout89kDwasexpressedafterinducedbyIPTG.DlCDC48expressedatallsomaitcembyogenesisstagesoflonganbyusingqPCRmethod.TheexpressionofDlC
8、DC48wasthelowestatglobularembryostage,whilethehighestwasatcompactglobularembryostage.TheselayafoundationforfuturestudytheCDC48genefunctionduringsomaticembryogenesisinplants.Keywords:Longan(Dimocarpuslongan);Somaticembryogenesis;CDC48gen
