降低茄子茎段组培染菌率的初步研究

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时间:2018-04-16

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1、研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES2016(7):64-67降低茄子茎段组培染菌率的初步研究11222211*乔 军 石 瑶 连 勇 刘富中 陈钰辉 张 映 李素文 王利英12(天津科润蔬菜研究所,蔬菜种质创新国家重点实验室,天津300384;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081)摘 要:茄子茎段组培容易染菌,为了测试15种灭菌方法的灭菌效果,选取紫圆茄、紫长茄、绿茄3种类型茄子品种,根据染菌率和植株再生成活率判断最佳灭菌方法。结果表明,不同类型茄子适用的灭菌方法不同。紫圆茄茎段适宜的灭菌方法为:2%N

2、aClO浸泡10min,再用0.1%HgCl2浸泡10min;紫长茄茎段适宜的灭菌方法为:4%NaClO浸泡10min,再用0.3%HgCl2浸泡10min;绿茄茎段适宜的灭菌方法为:6%NaClO浸泡10min,再用0.1%HgCl2浸泡10min。绿茄茎段保存试验结果表明,低温保存有利于降低茄子茎段组培染菌率,其中最适保存条件为5℃下保存3d以内,染菌率在20%以下,再生成活率保持在60%左右,可以满足植株再生要求。关键词:茄子;茎段;组培;染菌率植物组织培养技术对单倍体育种、诱变育种及到的问题,亟待找

3、出更好的灭菌方法以降低染菌率。种质保纯脱毒等方面具有重要意义(王利英等,茎段培养可以快速、有效地繁殖所需材料,2015,2016),经过近一个世纪的发展,已经在科尤其对于无种子种质资源及野生资源保存意义重大研和生产上广泛应用(周俊辉,1999)。污染、褐(黄碧兰等,2008)。本试验研究了不同品种、不化和玻璃化是组培中经常碰到的问题,尤其细菌污同灭菌方式和保存条件对茄子茎段组培染菌率和植染最为普遍(胡凯等,2007)。采取有效的灭菌方株再生成活率的影响,旨在为构建茄子茎段离体再法对外植体进行彻底灭菌,同时又不伤害生长点,生体系

4、奠定基础。保证外植体较高的成活率是组培成功的关键(穆红1 材料与方法梅等,2015)。近年来由于基因工程的快速发展,茄子再生体系研究受到重视,前人主要从外植体类1.1 试验材料型(俞琼等,2007;方岩岩等,2013)、激素(洪试验于2014年在天津科润蔬菜研究所进行,晓华等,2009;李烨等,2014)、无菌苗生产(谢供试茄子类型共3种,均为天津科润蔬菜研究所自超等,2012)、不定芽及根诱导(黄志银和曹必好,育品种。圆茄品种圆丰园为紫圆茄一代杂种,紫红2012;张明华等,2014)等方面进行了广泛的再生茎,茎有白色

5、绒毛;长茄品种津丰长茄4号为紫长体系研究。国外学者对组培相关研究主要集中在单茄一代杂种,紫黑茎,茎有白色绒毛;绿茄品种青倍体诱导和茎尖脱毒上(Salasetal.,2011;Wang丰1号为绿茄一代杂种,绿茎,茎有白色绒毛。6etal.,2016)。染菌是所有茄子再生研究中经常碰月15日播种育苗,7月25日定植于日光温室,每份材料种植50株,株距50cm,行距70cm,高垄乔军,男,助理研究员,专业方向:茄子生物育种,E-mail:sxdtqj886@126.com地膜覆盖,正常栽培管理。*通讯作者(Correspon

6、dingauthor):王利英,女,研究员,专业方向:1.2 试验设计茄子育种,E-mail:sun_hwg@126.com1.2.1 灭菌方法 试验在超净工作台中进行,共设收稿日期:2016-01-15;接受日期:2016-05-26置15种灭菌方法(表1),选取3个类型茄子品种,基金项目:天津市农业科技成果转化与推广项目(201304020),黄瓜等每个品种3次重复,分3d进行。10月1日开始采主要蔬菜商业化育种技术研究与示范项目(2014BAD01B0802),天津市财政项目高端设施茄果类蔬菜新品种示范推广项目集带有生长

7、点的幼嫩茎段,茎段长度为5~8cm,—64—《中国蔬菜》学术论文下载www.cnveg.org中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文每个品种采集39个茎段,3个品种共计117个茎2 结果与分析段,分别装在1000mL透明试剂瓶中。采样后1、2、3d采用第1种灭菌方法,每天每个品种取132.1 不同灭菌方法对组培染菌率的影响个茎段进行灭菌组培;之后继续采集3个品种共计15种灭菌方法的染菌率差异明显(表2)。采117个茎段,每天每个品种取13个茎段采用第2用灭菌方法7,即用2%NaClO浸泡10min、再用种

8、灭菌方法进行灭菌组培;以此类推,直到15种0.1%HgCl2浸泡10min,普通MS培养基转接紫圆灭菌方法全部试验完毕。茎段组培10d后统计染茄茎段培养10d后染菌率仅为9.2%;但该灭菌方菌率。法并不适用于紫长茄和绿茄。采

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