鹤望兰二氢黄酮醇_4_还原酶基因srdfr的克隆及表达分析

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1、福建农业学报２９（８）：７４８～７５１，２０１４文章编号：１００８－０３８４（２０１４）０８－７４８－０４ＦｕｊｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ樊荣辉，黄敏玲，钟淮钦，等．鹤望兰二氢黄酮醇－４－还原酶基因ＳｒＤＦＲ的克隆及表达分析［Ｊ］．福建农业学报，２０１４，２９（８）：７４８－７５１．ＦＡＮＲ－Ｈ，ＨＵＡＮＧＭ－Ｌ，ＺＨＯＮＧＨ－Ｑ，ｅｔａｌ．ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＤｉｈｙｄｒｏｆｌａｖｏｎｏｌ４－ｒｅｄｕｃｔａｓｅｉｎＳｔｒｅｌｉｔｚｉａｒｅｇｉｎａｅ［Ｊ］．ＦｕｊｉａｎＪｏｕ

2、ｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，２０１４，２９（８）：７４８－７５１．鹤望兰二氢黄酮醇－４－还原酶基因ＳｒＤＦＲ的克隆及表达分析樊荣辉１，２，３，黄敏玲１，２，３＊，钟淮钦１，２，３，吴建设１，２，３（１．福建省农业科学院作物研究所，福建福州３５００１３；２．福建省农业科学院花卉研究中心，福建福州３５００１３；３．福建省特色花卉工程技术研究中心，福建福州３５００１３）摘要：采用ＲＴ－ＰＣＲ方法从鹤望兰蓝色花瓣中克隆到类黄酮合成途径关键基因ＳｒＤＦＲ，该片段长２４６ｂｐ，编码８２个氨基酸。氨基酸同源性分析表明，ＳｒＤＦＲ推导的氨基酸

3、序列与已报道的其他植物的ＤＦＲ蛋白具有很高的同源性。系统进化树分析显示，鹤望兰ＳｒＤＦＲ与姜荷花聚为一类，亲缘关系较近。应用半定量ＰＣＲ分析表明，ＳｒＤＦＲ在蓝色花瓣中高表达，在黄色花萼和叶片中低表达，且在花发育的始花期表达量最高，表明该基因在蓝色花瓣发育过程中起着重要作用。关键词：鹤望兰；二氢黄酮醇－４－还原酶；类黄酮生物合成；基因克隆中图分类号：Ｓ６８２文献标识码：ＡＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＤｉｈｙｄｒｏｆｌａｖｏｎｏｌ４－ｒｅｄｕｃｔａｓｅｉｎＳｔｒｅｌｉｔｚｉａｒｅｇｉｎａｅ１，２，３，ＨＵＡＮＧＭｉｎ－ｌｉ

4、ｎｇ１，２，３＊，ＺｈＯＮＧＨｕａｉ－ｑｉｎ１，２，３，ＷＵＪｉａｎ－ｓｈｅ１，２，３ＦＡＮＲｏｎｇ－ｈｕｉ（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＦｕｊｉａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ３５００１３，Ｃｈｉｎａ；２．ＦｌｏｗｅｒｓＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＦｕｊｉａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ３５００１３，Ｃｈｉｎａ；３．ＦｕｊｉａｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｆｏｒＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃＦｌ

5、ｏｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ３５００１３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅＳｒＤＦＲｇｅｎｅｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｓｙｎｔｈｅｓｉｓｗａｓｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｂｌｕｅｐｅｔａｌｓｏｆｓｔｒｅｌｉｔｚｉａｒｅｇｉｎａｅｕｓｉｎｇＲＴ－ＰＣＲｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．ＴｈｅｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｃｏｎｓｉｓｔｓｏｆ２４６ｂｐ，ｅｎｃｏｄｉｎｇａｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｏｆ８２ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ．ＨｏｍｏｌｏｇｙａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｄｅｄｕｃｅｄＳｒＤＦＲｐｒｏｔｅｉ

6、ｎｗａｓｈｉｇｈｌｙｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｔｏｏｔｈｅｒＤＦＲｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｌａｎｔｓ．ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＳｒＤＦＲｗａｓｃｌｕｓｔｅｒｅｄｔｏｇｅｔｈｅｒｗｉｔｈＤＦＲｏｆＣｕｒｃｕｍａａｌｉｓｍａｔｉｆｏｌｉａｆｉｒｓｔｌｙａｎｄｈａｄｃｌｏｓｅｇｅｎｅｔｉｃｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．Ｔｈｅｓｅｍｉ－ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲａｎａｌｙｓｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＳｒＤＦＲｓｈｏｗｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｂｕｎｄａｎｃｅｉｎｅａｎｄＳｒＤＦＲｗ

7、ａｓｈｉｇｈｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｂｌｕｅｐｅｔａｌｓ，ｂｕｔｌｏｗｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｌｅａｖｅｓａｎｄｙｅｌｌｏｗｓｅｐａｌｓ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＳｒＤＦＲｐｌａｙｅｄａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｂｌｕｅｐｅｔａｌｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｔｒｅｌｉｔｚｉａｒｅｇｉｎａｅ；ｄｉｈｙｄｒｏｆｌａｖｏｎｏｌ４－ｒｅｄｕｃｔａｓｅ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；ｇｅｎｅｃｌｏｎｉｎｇ鹤望兰Ｓｔｒｅｌｉｔｚｉａｒｅｇｉｎａｅ，又称天堂鸟，为旅氢黄酮醇４－还原酶（ｄｉｈｙｄｒｏｆｌａｖ

8、ｏｎｏｌ４－ｒｅｄｕｃｔａｓｅ，人蕉科鹤望兰属多年生观赏植物。因其花色艳丽，ＤＦＲ）是花色素苷