番荔枝开花调控转录因子基因asleafy的克隆与表达分析

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1、园艺学报，2015，42(8)：1467–1476.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0162；http：//www.ahs.ac.cn1467番荔枝开花调控转录因子基因AsLEAFY的克隆与表达分析1,*121111刘锴栋，黄素娜，姜艳，黎海利，袁长春，刘金祥，陈燕12（岭南师范学院生命科学与技术学院，广东湛江524048；浙江省中药研究所有限公司，杭州310023）摘要：利用同源克隆和RACE-PCR获得番荔枝LEAFY基因的全长cDNA序列，命名为AsLEAFY，GenBank登录号为KP8661

2、45。序列分析表明，克隆获得的番荔枝AsLEAFY基因长为1236bp，编码411个氨基酸，该氨基酸序列含有5′-N端脯氨酸富集区和中央酸性区，具有LEAFY（FLO）家族的典型结构特征。同源分析表明，该氨基酸序列与多种木本植物LEAFY类蛋白的同源性较高。进化树分析表明AsLEAFY与木本植物的亲缘关系高于草本植物。实时定量PCR结果表明，AsLEAFY在番荔枝花发育的整个过程中都有表达，在初期的花芽中表达量最高，在不同组织器官中表达量存在差异，在枝条去叶后的腋芽中的表达量最高。推测该基因在番荔枝花器官形成初期发挥重要作用。关键词：番荔枝；LEAFY；花发育；表达模式中图分类号：S

3、667.1文献标志码：A文章编号：0513-353X（2015）08-1467-10CloningandExpressionAnalysisofFloweringRelatedTranscriptionFactorAsLEAFYfromSugarApple1,*12111LIUKai-dong，HUANGSu-na，JIANGYan，LIHai-li，YUANChang-chun，LIUJin-xiang，and1CHENYan12（LifeScienceandTechnologySchool，LingnanNormalUniversity，Zhanjiang，Guangdong52

4、4048，China；ZhejiangResearchInstituteofTraditionalChinesemedicineCo.，LTD，Hangzhou310023，China）Abstract：Afull-lengthcDNAsequenceofthehomologousLEAFYgenefromsugarapple（AnnonasquamosaL.），whichwasnamedasAsLEAFY（GenBankaccessionKP866145），wasclonedbyemployinghomologygenecloningandRACEapproaches.Sequen

5、ceanalysisshowedthattheAsLEAFYgenecontainsa1236bpopenreadingframe（ORF）encoding411aminoacids.AsthetypicalstructurefeaturesofLEAFY（FLO）family，a5′-Npraline-richregionandacentralacidicregionwereidentifiedintheaminoacidsequenceofAsLEAFYprotein.ThededucedAsLEAFYproteinishighlyhomologoustotheLEAFYprot

6、einsfromothervariouswoodyplants.PhylogenetictreeanalysisindicatedthatAsLEAFYshowscloserrelationshipwiththeLEAFYsinwoodyplantsthaninherbs.Thereal-timePCRresultssuggestedthattheAsLEAFYgenecouldbedetectedduringthewholeperiodofflowerdevelopment.Interestingly，收稿日期：2015–04–17；修回日期：2015–07–06基金项目：国家自然

7、科学基金项目（31201586）；广东省科技计划项目（2013B020304008）；广东省教育厅科技创新项目（2013KJCX0124）；湛江市热带特色资源植物技术开发重点实验室项目（2014A06008）；湛江市科技攻关计划项目（2012C3102019）；湛江师范学院科研创新团队资助项目（2013CXTD05）*E-mail：liukaidong2001@126.com；Tel：0759-3183086LiuKai-dong，HuangSu-na，J